专利摘要

本发明涉及化学结构式I或式Ⅱ所示的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺：式中R、R1选自：氢、氘、C1～C2烷基、C3～C4直链或支链烷基；X1、X2、X4、X5、X6、X7、X8、X10选自：氢、氘或C1～C2烷基；X3选自：氟、氯、溴；X3选自：硝基；X9选自：氟、氯、溴；2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺在制备抗癌药物中的应用。

权利要求

1.化学结构式I或式Ⅱ所示的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺：

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴；式I所示的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺又名N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺；式Ⅱ所示的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺又名N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺。

2.N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(I)的制备方法，其特征在于它的制备反应如下：

其中，R、R¹、X¹、X²、X³、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X⁹和X¹⁰的定义如权利要求1所述。

3.N-(吡啶-4-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(Ⅱ)的制备方法，其特征在于它的制备反应如下：

其中，R、R¹、X¹、X²、X³、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X⁹和X¹⁰的定义如权利要求1所述。

4.权利要求1所述的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺在制备抗癌药物中的应用。

5.N-(3-硝基吡啶-2-基)-2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰胺在制备抗肺腺癌药物中的应用。

说明书

技术领域

本发明涉及一类化合物及其新用途，具体是2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

4-芳氧基苯氧基烷酸衍生物在具有广泛的生物活性，其中芳氧苯氧丙酸衍生物作为其典型代表，在农用除草剂中已有20多个商品化品种。同时4-芳氧基苯氧基烷酸衍生物在抗癌药物的研究中也有大量报道[InvestigationalNewDrugs，1999，16:287–296；InvestigationalNewDrugs，1998，16:129–139；药学学报，2005，40(9):814-819]，其中XK469(2-(4-(7-氯喹喔啉-2-基氧基)苯氧基)丙酸)是美国杜邦公司正在进行Ⅰ期临床研究的一新型抗肿瘤药物，XK469具有很广的抗瘤谱，副作用小，对多种实体瘤模型有效，如结肠癌Colon38和乳腺癌等[JMedChem，2001，44(11):1758-76]。2-苯氧基烷酰胺应用的中国发明专利如下：(1)2-[4-(苯并噁唑-2-基氧基)苯氧基]烷酰胺及其应用，CN103086995A，2013.5.8公开；(2)2-(4-芳氧基苯氧基)烷酰胺及其应用，CN103086921A，2013.5.8公开；(3)2-[4-(喹喔啉-2-基氧基)苯氧基]烷酰胺及其应用，CN103086985A，2013.5.8公开；(4)具有生物活性的N-氧基稠杂氧苯氧羧酸酰胺类化合物及其制备方法，2013.1.31申请，CN201310038398.3；(5)N-(芳基烷基)芳氧苯氧羧酸酰胺类化合物及其制备方法与应用，2013.7.2申请，CN201310274623.3；(6)N-(芳基烷氧基)芳氧苯氧羧酸酰胺类化合物及其制备方法与应用，2013.7.2申请，CN201310273568.6。

2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺的抗癌活性没有研发报道。

发明内容

本发明提供了式I或式Ⅱ所示的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺：

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺又名N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(I)或N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(Ⅱ)。

2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺(I或Ⅱ)的制备方法，其特征在于它的制备反应如下：

或

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

本发明提供的2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺(I或Ⅱ)具有抗癌活性，在制备抗癌药物中的应用：

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

本发明提供的N-(3-硝基吡啶-2-基)-2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰胺在制备抗肺腺癌药物中的应用。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1

N-(3-硝基吡啶-2-基)-2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰胺的制备

2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰氯(3.3mmol)、二氯甲烷(40mL)，2-氨基-3-硝基吡啶(3.3mmol)和催化量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)，搅拌10min，滴加三乙胺(1.0g，10mmol)，回流7h，反应液倒入150ml冰水中，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，脱溶，柱层析得到N-(3-硝基吡啶-2-基)-2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰胺，熔点156.0～156.3℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)δ：1.74(d，J＝6.6Hz，3H，CH₃)，4.90(q，J＝6.6Hz，1H，CH)，7.12～7.45(m，8H，苯环-H，吡啶环-H，苯并噁唑-H)，8.53(dd，J₁＝8.1Hz，J₂＝1.2Hz，1H，吡啶环-H)，8.79(d，J＝3.0Hz，1H，苯并噁唑-H)，11.20(s，1H，NH)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ：18.45，75.70，110.64，116.59，119.19，119.76，121.63，125.05，128.81，133.74，134.81，139.38，145.02，147.32，148.41，154.16，154.59，162.68，169.77；LC-MS，m/z：455.0[M+1]⁺。

实施例2

N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(I)的制备

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

按实施例1方法制备N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(I)。

实施例3

N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(Ⅱ)的制备

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

按实施例1方法制备N-(吡啶-2-基)-2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰胺(Ⅱ)。

实施例4

2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺的抗肿瘤活性

1.抗肿瘤活性原理

MTT法生物活性测试又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT分析法以活细胞代谢物还原剂噻唑蓝[3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide，MTT]为基础。MTT是一种能接受氢原子的染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲瓒(formazon)，而死细胞则无此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波长下用酶标仪测定光密度值，既可定量测出细胞的存活率。根据光密度值的变化观察样品对肿瘤细胞的抑制作用。

2.抗肿瘤活性实验

试样：2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺(I或Ⅱ)：

式中R、R¹选自：氢、氘、C₁～C₂烷基、C₃～C₄直链或支链烷基；X¹、X²、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷、X⁸、X¹⁰选自：氢、氘或C₁～C₂烷基；X³选自：氟、氯、溴；X³选自：硝基；X⁹选自：氟、氯、溴。

细胞系：肺腺癌细胞系A549(中南大学湘雅医学院细胞库提供)。

试剂：噻唑蓝(MTT)、RPMI1640培养液、新生牛血清、抗生素(美国英杰生命技术公司)；胰酶(美国AMRESCO公司)；96孔培养板(美国英杰生命技术公司)；二甲基亚砜(美国Sigma公司)。

仪器：HFsafe-1500型超净工作台、HF151UV型CO₂培养箱(上海力申科学仪器有限公司)；XSP-15C型倒置显微镜(上海长方光学仪器有限公司)；MultiskanMK3型酶标仪(美国Thermo公司)；超纯水制备仪(美国Milli-Q公司)。

实验操作：试样对于癌细胞的测试。一次实验过程中，每种试样设置5个浓度梯度(1.000μmol/mL、0.300μmol/mL、0.100μmol/mL、0.030μmol/mL和0.010μmol/mL)，每个浓度四个平行试样，每组实验平行3次，并通过空白组对照得出结论。酶标仪检测各孔OD值，检测波长570nm。

3.抗肿瘤活性评价

1)细胞抑制率计算：

2)IC₅₀值计算

试样浓度对数值与细胞抑制率线性回归，利用软件计算试样对细胞的半数抑制浓度IC₅₀值。活性测试结果显示，N-(3-硝基吡啶-2-基)-2-[4-(6-氯苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]丙酰胺对肺腺癌细胞A549的IC₅₀值为0.046mM。

活性测试结果表明，2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺对癌细胞具有良好的抑制活性，可用于制备抗癌药物。

2-[4-(苯并噁唑-2-氧基)苯氧基]脂肪酰吡啶胺的医药用途专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。