专利摘要

本发明公开了通式I的噻唑并[3,2‑b][1,2,4]‑三氮唑‑6‑乙酰胺类衍生物衍生物或其药学可接受的水合物、盐，包括其立体异构体或互变异构体，式I中的R1为氢、甲基、卤素、羟基、甲氧基、乙酰基、丙酰基、硝基或烷氧基。R2和R3独立的选自C1‑C6的烷基，或R2和R3与他们相连的氮原子一起组成吡咯基，哌啶基，吗啉基，N‑甲基哌嗪，N‑苯基哌嗪。本发明的噻唑并[3,2‑b][1,2,4]‑三氮唑‑6‑乙酰胺类衍生物对乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用，用于增强患有痴呆和阿尔茨海默症病人的记忆力。本发明还涉及该类化合物的制备方法及用于制备治疗老年痴呆症药物的用途。

权利要求

1.一种乙酰胆碱酯酶抑制剂，具有增强痴呆和阿尔茨海默氏症病人记忆力的作用，其特征在于：该化合物为具有通式I的噻唑并[3,2-b][1,2,4]-三氮唑-6-乙酰胺类衍生物或其药学可接受的水合物、盐，包括其立体异构体或互变异构体；

其中，式I中的R₁为氢、甲基、卤素、羟基、甲氧基、乙酰基、丙酰基、硝基或烷氧基；R2和R3独立的选自C1-C6的烷基，或R2和R3与他们相连的氮原子一起组成吡咯基，哌啶基，吗啉基，N-甲基哌嗪，N-苯基哌嗪。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述R₁为氟和氯。

3.权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于：其合成路线如下式所示：

。

4.根据权利要求1所述的化合物，包括：

N,N-二甲基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺；

N,N-二乙基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺；

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-哌啶)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑；

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-吗啉)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑；

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-(4-甲基哌嗪))乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑；

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-吡咯烷)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑；

N,N-二正丁基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺；

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-(4-苯基哌嗪))乙基]-噻唑并[3,2-b] [1,2,4]三氮唑。

5.权利要求1所述的化合物用于制备抗老年痴呆药物的用途。

说明书

技术领域

本发明本发明属于医药技术领域，尤其涉及噻唑并[3,2-b][1,2,4]-三氮唑-6-乙酰胺类衍生物及其制备方法与作为乙酰胆碱酯酶抑制剂，用于提高患有痴呆和阿尔茨海默氏症病人记忆的应用。

背景技术

阿尔茨海默氏病与基底前脑中的胆碱能神经元的退化有关。由于所述退化的结果，患有该疾病的患者在乙酰胆碱合成、胆碱乙酰基转移酶活性、乙酰胆碱酯酶活性和胆碱吸收方面表现出明显的衰减。

已知乙酰胆碱酯酶抑制剂在提高胆碱能活性方面是有效的，因此可用于改善阿尔茨海默氏病患者的记忆。通过抑制乙酰胆碱酯酶，所述化合物可提高大脑中神经传递递质乙酰胆碱的水平，因此可增强记忆。

现有的乙酰胆碱酯酶抑制剂如他克林，斯的明，加兰他敏等，依然存在耐药性或药物动力学缺陷。本发明所述化合物作为全新结构类型的乙酰胆碱酯酶抑制剂，具有结构类型新颖，药效作用与现有药物相当或优于现有药物的特点，具有良好的应用价值和开发应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种噻唑并[3,2-b][1,2,4]-三氮唑-6-乙酰胺类衍生物，其具有良好的乙酰胆碱酯酶抑制活性。

本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的：

一种乙酰胆碱酯酶抑制剂，具有增强痴呆和阿尔茨海默氏症病人记忆力的作用，其特征在于：该化合物为具有通式I的噻唑并[3,2-b][1,2,4]-三氮唑-6-乙酰胺类衍生物或其药学可接受的水合物、盐，包括其立体异构体或互变异构体；

其中，式I中的R1为氢、甲基、卤素、羟基、甲氧基、乙酰基、丙酰基、硝基或烷氧基；R2和R3独立的选自C1-C6的烷基，或R2和R3与他们相连的氮原子一起组成吡咯基，哌啶基，吗啉基，N-甲基哌嗪，N-苯基哌嗪。

本发明中应用的术语“卤素”包括氟、氯或溴。

本发明还提供了上述化合物用于制备治疗老年痴呆症药物的用途。

“药学上可接受的盐”指保留了式Ⅰ化合物的生物效力和性质，并与合适的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐的实例包括醋酸盐，己二酸盐，藻酸盐，天冬氨酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊丙酸盐，二葡萄糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，氢氯酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，2-羟基乙磺酸盐，乳酸盐，马来酸盐，甲磺酸盐，2-萘磺酸盐，烟酸盐，硝酸盐，草酸盐，扑酸盐，果胶酯酸盐，过硫酸盐，3-苯基丙酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，甲苯磺酸盐和十一酸盐。碱盐包括铵盐，碱金属盐，例如钠和钾盐，碱土金属盐，例如钙和镁盐，有机碱的盐，例如二环己胺盐，N-甲基-D-葡糖胺盐，和氨基酸的盐，例如精氨酸，赖氨酸等，而且，碱性含氮基团可以用这样的试剂季铵化，例如低级烷基卤化物，如甲基，乙基，丙基和丁基的氯，溴和碘化物；硫酸二烷基酯，如硫酸二甲酯，二乙酯，二丁酯和二戊酯；长链卤化物，如癸基，月桂基，肉豆蔻基和硬脂酰基的氯，溴和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基的溴化物等。优选用于生成酸加成盐的酸包括盐酸和醋酸。

本发明还提供了上述通式I化合物的制备方法，该方法见下式。

本发明系统研究和阐释了所述化合物的结构和制备，所述化合物作为一类新的乙酰胆碱酯酶抑制剂，结构类型新颖，为开发新型抗老年痴呆症药物提供了全新的方向和广阔的平台。

具体实施方式

实施例1

2-{2-(4-氯苯基)噻唑[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}乙酸的制备

在250 mL三口瓶内加入硫代氨基脲0.1 mo1，二氯甲烷100 mL，冰水浴搅拌溶解，再加入0.13 mo1吡啶。在0-5℃缓慢滴加4-氯苯甲酰氯0.13mo1，20 min滴加完毕，15℃反应2 h，结束反应。体系有大量白色固体出现，过滤。将所得白色固体溶解于80 mL质量分数5％的氢氧化钠溶液中，加热回流2h，降至室温，以质量分数3.65％的稀盐酸调pH至5-6，有大量浅黄色固体析出，过滤，重结晶，得到5-(4-氯苯基)-3-巯基-1,2,4-三氮唑18.3g，收率86.7%，ESI-MS (m/z): 212.3(M+H)+。

将0.6mol5-(4-氯苯基)-3-巯基-1，2，4-三氮唑加入到10mL10%的KOH溶液中，然后滴加0.01mol4-氯乙酰乙酸乙酯，加热反应1h后，冰水稀释有大量晶体析出，干燥得4-[3-(4-氯苯基)-1H-1,2,4-三氮唑-5-硫基]-3-氧代丁酸乙酯，收率40%。

将0.2mol4-[3-(4-氯苯基)-1H-1,2,4-三氮唑-5-硫基]-3-氧代丁酸乙酯加入到120℃85%PPA中，反应1h，反应结束后冷却至室温，加入冰水，有大量固体析出，抽滤，无水乙醇重结晶得到2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}乙酸乙酯，收率42%。

将0.1mol2-[2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基]乙酸乙酯加入到2mol/L的NaOH中，再加入20mL甲醇，室温反应2h，减压除去甲醇，用浓盐酸调pH=2，有大量固体析出，抽滤，无水乙醇重结晶得浅黄色粉末2-{2-(4-氯苯基)噻唑[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}乙酸，收率66% ，ESI-MS (m/z): 294.3(M+H)+。

实施例2

N,N-二甲基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺（ L1）的制备

10mmol二甲胺盐酸盐，10mmol2-{2-(4-氯苯基)噻唑[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}乙酸，20mL二氯甲烷加入到圆底烧瓶中，然后再加入12mmolEDCI，12mmolHOBt和三乙胺10mmol，室温反应12h后，反应液依次用5%HCl，5%NaHCO3，饱和NaCl溶液洗，干燥后柱层析分离得白色固体，收率32%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.50 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.41 (1H, s), 7.38 (2H, d, J = 8.4Hz)，4.89 (2H, s), 3.96 (3H, s), 3.02 (3H, s)； ESI-MS (m/z)：321.4 (M+H)+。

实施例3

N,N-二乙基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺（ L2）的制备

将二甲胺盐酸盐用二乙胺替换，合成方法参照实施例2，收率34%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.52 (2H, d, J = 9.0Hz), 7.42 (1H, s), 7.37 (2H, d, J = 9.0Hz), 4.86 (2H, s), 3.98 (2H, m), 3.32 (2H, m), 1.18 (3H, t), 1.05 (3H, t); ESI-MS (m/z): 349.0 (M+H)+。

实施例4

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-哌啶)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑（ L3）的制备

将二甲胺盐酸盐用哌啶替换，合成方法参照实施例2，收率35%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.52 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.42 (1H, s), 7.37 (2H, d, J = 8.4Hz), 4.88 (2H, s), 3.44 (2H, m), 3.41 (2H, m), 1.60 (2H, m), 1.55 (2H, m), 1.45 (2H, m); ESI-MS (m/z): 361.2 (M+H)+。

实施例5

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-吗啉)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑（L4）的制备

将二甲胺盐酸盐用吗啉替换，合成方法参照实施例2，收率36%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.51 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.41 (1H, s), 7.38 (2H, d, J = 8.4Hz), 4.78 (2H, s), 3.67 (4H, m), 3.37 (4H, m); ESI-MS (m/z): 363.1(M+H)+。

实施例6

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-(4-甲基哌嗪))乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑（ L5）的制备

将二甲胺盐酸盐用N-甲基哌嗪替换，合成方法参照实施例2，收率32%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.50 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.42(1H, s), 7.31 (2H, d, J = 8.4Hz), 4.78 (2H, s), 3.66 (4H, dt), 3.44 (4H, t), 2.36 (3H, s); ESI-MS (m/z): 376.0(M+H)+。

实施例7

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-吡咯烷)乙基]-噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑（ L6）的制备

将二甲胺盐酸盐用四氢吡咯替换，合成方法参照实施例2，收率29%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.52 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.39(1H, s), 7.28 (2H, d, J = 8.4Hz), 4.28 (2H, s), 3.63 (2H, t), 3.54 (2H, t), 2.07 (2H, m), 1.99 (2H, m); ESI-MS (m/z): 347.0(M+H)+。

实施例8

N,N-二正丁基-2-{2-(4-氯苯基)噻唑并[3,2-b][1,2,4]三氮唑-6-基}-乙酰胺（ L7）的制备

将二甲胺盐酸盐用二正丁基替换，合成方法参照实施例2，收率47%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.52 (2H, d, J = 9.0Hz), 7.38(1H, s), 7.30 (2H, d, J = 9.0Hz), 4.06 (2H, s), 3.98 (2H, m), 3.38 (2H, m), 1.69 (2H, m), 1.55 (2H, m), 1.42 (2H, m), 1.30 (2H, m), 1.05 (6H, m); ESI-MS (m/z): 405.1 (M+H)+。

实施例9

2-(4-氯苯基)-6-[(1-氧代-1-(4-苯基哌嗪))乙基]-噻唑并[3,2-b] [1,2,4]三氮唑（ L8）的制备

将二甲胺盐酸盐用N-苯基哌嗪替换，合成方法参照实施例2，收率32%。

1H-NMR(300MHz，DMSO)，δ(ppm)：7.48 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.42(1H, s), 7.34 (2H, m), 7.30 (2H, d, J = 8.4Hz), 6.97 (5H, m), 3.95 (2H, s), 3.57(4H, dt), 3.35 (4H, dt); ESI-MS (m/z): 438.0(M+H)+。

实施例10

乙酰胆碱酯酶抑制剂的活性测定试验

1. 材料的准备：阳性对照药设定为氢溴酸新斯的明（SigmaN-2001），配制为0.1M溶液；乙酰胆碱酯酶（人源）（SigmaC-1682）0.5单位；缓冲溶液为100mM PBS溶液（pH7.4），10mM 二硫二硝基苯甲酸DTNB（D-8130）（用100mM PBS配制），-20℃避光保存，现制现用；12.5mM硫代乙酰胆碱ATCh（A－5751）溶解于水中，-20℃避光保存，现制现用；受试药物用DMSO溶解后制备成10μM溶液。

2.方法：

(1)按如下表方法处理样品；

(2)37℃连续轻轻振摇预热15分钟；

(3)加入50mL ATCh和50mL DTNB；

(4)37℃连续轻轻振摇约20分钟,直到反应液出现黄色；

(5)测定其412nm处的OD值；

(6)计算抑制率，乙酰胆碱酯酶抑制率=1-(OD实验组-OD空白组) /(OD实验对照组-OD空白组)×100%。结果如表1所示。

（7）测得抑制乙酰胆碱酯酶抑制活性的IC50，结果如表2所示。

3. 结果：

化合物L1，L2，L3，L4，L5，L6，L7和L8 对乙酰胆碱酯酶均有较好的抑制活性。

噻唑并三氮唑-6-乙酰胺类衍生物及应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。