专利摘要
专利摘要
本发明公开了一种罗汉果浸提液抑藻剂及其制备方法和应用，该制备方法包括：a、将罗汉果粉碎制成罗汉果粉末；b、将罗汉果粉末、醇和水混合中以制得罗汉果悬浊液；c、将所述罗汉果悬浊液浓缩制得罗汉果浸提液抑藻剂。通过该方法制得的罗汉果浸提液抑藻剂能够有效地抑制藻类的生长。
权利要求
1.一种罗汉果浸提液抑藻剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
a、将罗汉果粉碎制成罗汉果粉末；
b、将所述罗汉果粉末和水混合以制得罗汉果悬浊液；
c、将所述罗汉果悬浊液浓缩制得罗汉果浸提液抑藻剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述罗汉果粉末的粒径不小于150目。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤b中，相对于1重量份的罗汉果粉末，所述水的用量为15-25重量份。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤b中，所述混合满足以下条件：混合时间为2-4天，混合温度为15-35℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤c中，以所述罗汉果浸提液抑藻剂的总重量为基准，所述罗汉果粉末的含量为8-12重量％。
6.一种罗汉果浸提液抑藻剂，其特征在于，所述罗汉果浸提液抑藻剂通过权利要求1-5中的任意一项所述的方法制备而得。
7.一种根据权利要求6所述的罗汉果浸提液抑藻剂在抑制藻类的生长中的应用。
说明书
技术领域
本发明涉及抑藻剂，具体地，涉及一种罗汉果浸提液抑藻剂及其制备方法和应用。
背景技术
藻类爆发是目前频繁出现在海水与淡水水域的一种灾害现象，在海洋中称为赤潮，在淡水中称为水华。能够形成水华的藻类主要是蓝藻门和绿藻门中的种类。在富营养化淡水水体中，以蓝藻门的铜绿微囊藻和鱼腥藻最为常见。
防止水华爆发和控制水华已成为当务之急。抑藻剂因能快速发挥抑藻作用以使水华得到缓解，从而成为水华应急处理的方法之一。抑藻剂可以分为物理性抑藻剂、化学性抑藻剂及生物化学性抑藻剂，这些抑藻剂的性质如下：1)物理性抑藻剂：抑藻效果显著，但是需要较长时间才能够见效，且会向水体中引入铁、铝等金属离子，虽污染低但仍有污染；2)化学性抑藻剂：见效快，在杀藻的同时对水生生物同样具有毒性，往往存在二次污染的隐患；3)生物性抑藻剂：低毒、低成本，因此成为当前水环境治理技术的研究方向。
现有生物性抑藻剂要么是抑制率在50％以下，要么是抑藻剂的用量较大。
发明内容
本发明的目的是提供一种罗汉果浸提液抑藻剂及其制备方法，通过该方法制得的罗汉果浸提液抑藻剂能够有效地抑制藻类的生长。
为了实现上述目的，本发明提供了一种罗汉果浸提液抑藻剂的制备方法，制备方法包括：
a、将罗汉果粉碎制成罗汉果粉末；
b、将罗汉果粉末、醇和水混合中以制得罗汉果悬浊液；
c、将所述罗汉果悬浊液浓缩制得罗汉果浸提液抑藻剂。
优选地，罗汉果粉末的粒径不小于150目。
优选地，在步骤b中，相对于1重量份的罗汉果粉末，所述水的用量为15-25重量份。
优选地，在步骤b中，混合满足以下条件：混合时间为2-4天，混合温度为15-35℃。
优选地，在步骤c中，以所述罗汉果浸提液抑藻剂的总重量为基准，所述罗汉果粉末的含量为8-12重量％。
本发明也提供了一种罗汉果浸提液抑藻剂，罗汉果浸提液抑藻剂通过上述的方法制备而得。
本发明还提供了一种根据上述的罗汉果浸提液抑藻剂在抑制藻类的生长中的应用。
通过上述技术方案，本发明通过将罗汉果粉碎后，接着将罗汉果粉末、和水混合浸泡，最后浓缩便制得罗汉果浸提液抑藻剂。该抑藻剂采用纯天然物质制备而得对环境污染小，同时该抑藻剂对藻类的抑制率高且用量小。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1是检测例1中的各份铜绿微囊藻液中的藻细胞密度的统计图；
图2是检测例1中的抑制率-培养时间的结果统计图；
图3是检测例3中的抑制率-培养时间的结果统计图；
图4是检测例4中的各份铜绿微囊藻液中的藻细胞密度的统计图。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
本发明提供了一种罗汉果浸提液抑藻剂的制备方法，制备方法包括：
a、将罗汉果粉碎制成罗汉果粉末；
b、将罗汉果粉末、醇和水混合中以制得罗汉果悬浊液；
c、将所述罗汉果悬浊液浓缩制得罗汉果浸提液抑藻剂。
在本发明提供的制备方法中，罗汉果粉末的粒径可以在宽的范围内选择，但是为了使得制得的罗汉果浸提液抑藻剂具有更优异的抑制藻类生长的效果，优选地，罗汉果粉末的粒径不小于150目。
在本发明提供的制备方法中，罗汉果粉末和水的用量可以在宽的范围内选择，但是为了使得制得的罗汉果浸提液抑藻剂具有更优异的抑制藻类生长的效果，优选地，在步骤b中，相对于1重量份的罗汉果粉末，所述水的用量为15-25重量份。
在本发明提供的制备方法中，混合的具体条件可以在宽的范围内选择，但是为了使得制得的罗汉果浸提液抑藻剂具有更优异的抑制藻类生长的效果，优选地，在步骤b中，混合满足以下条件：混合时间为2-4天，混合温度为15-35℃。
在本发明中，罗汉果浸提液抑藻剂中的固液重量比可以在宽的范围内选择，但是为了使得制得的罗汉果浸提液抑藻剂具有更优异的抑制藻类生长的效果，优选地，在步骤c中，以所述罗汉果浸提液抑藻剂的总重量为基准，所述罗汉果粉末的含量为8-12重量％。
本发明也提供了一种罗汉果浸提液抑藻剂，罗汉果浸提液抑藻剂通过上述的方法制备而得。
本发明还提供了一种根据上述的罗汉果浸提液抑藻剂在抑制藻类的生长中的应用。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，罗汉果为芜湖百姓大药房的市售品；铜绿微囊藻液：将铜绿微囊藻PCC7806(购自于中国科学院水生生物研究所藻种库)在BG-11培养基(具体成分见表1)中进行培养得到铜绿微囊藻液，培养条件为：光照强度为4000lx，光暗比为12h：12h，温度为24-26℃，每天摇动的次数为3-5次，培养7天后得到铜绿微囊藻液。
表1
实施例1
a、将罗汉果打碎，过150目的筛子制得罗汉果粉末；
b、在25℃下，将罗汉果粉末浸泡于水中3天制得罗汉果悬浊液；其中，罗汉果粉末与水溶液的质量比为1:20。
c、将上述罗汉果悬浊液浓缩直至固液重量比为1:10时制得罗汉果浸提液抑藻剂A1。
对比例1
a、将罗汉果打碎，过150目的筛子制得罗汉果粉末；
b、在4℃下，将罗汉果粉末浸泡于水中3天，然后在25℃下微孔滤膜过滤除菌(微孔滤膜直径0.22μm，产家：上海兴亚)制得罗汉果悬浊液；其中，罗汉果粉末与水溶液的质量比为1:20。
c、将上述罗汉果悬浊液浓缩直至固液重量比为1:10时制得罗汉果浸提液抑藻剂B1。
对比例2
a、将罗汉果打碎，过150目的筛子制得罗汉果粉末；
b、在100℃下，将罗汉果粉末浸泡于水中煮沸10分钟并在121℃下灭菌20min制得罗汉果悬浊液；其中，罗汉果粉末与水溶液的质量比为1:20。
c、将上述罗汉果悬浊液浓缩直至固液重量比为1:10时制得罗汉果浸提液抑藻剂B1。
检测例1
将不同量的罗汉果浸提液抑藻剂A1加入至铜绿微囊藻液(稀释使得铜绿微囊藻液的初始的藻细胞密度为5×105cells/ml)中使得铜绿微囊藻液中的罗汉果浸提液的质量分数分别为0、0.04％、0.08％、0.12％、0.16％和0.2％，每隔24h计算一次铜绿微囊藻液中的藻细胞密度，连续计算7天。具体结果见图1。由图1可知，罗汉果浸提液抑藻剂A1对藻类具有优异的抑制生长作用；并且铜绿微囊藻液中的罗汉果浸提液抑藻剂A1的浓度的增大，抑制率越大；罗汉果浸提液抑藻剂A1在铜绿微囊藻液中的时间越长，抑制率越大。
检测例2
将五份正常生长的铜绿微囊藻液(藻细胞密度为2.2×106cells/ml)分别稀释到原藻液的100％、80％、60％、40％、20％，然后向这五份铜绿微囊藻液中加入罗汉果浸提液抑藻剂A1使得其在各自的铜绿微囊藻液中的质量分数为2％。然后分别在3h、6h、1天、2天和3天后用血球计数法统计藻细胞密度并且计算抑制率，具体结果见图3。
由图3可知，罗汉果浸提液抑藻剂A1对藻细胞密度为1.2×106cells/ml-6×106cells/ml的铜绿微囊藻液均具有优异的抑制作用。
检测例3
将检测例2中各培养瓶在第4天离心去除培养液，然后各加入50ml新鲜BG-11培养基，放在培养箱中进行培养，培养条件为：光照强度为4000lx，光暗比为12h：12h，温度为24-26℃，每天摇动的次数为3-5次，分别于1d、2d、3d用血球计数板计算藻细胞密度(更换培养液的那一天记为0d)，其中以50ml的铜绿微囊藻液作为对照组，抑藻率(IR)＝(1-N/N0)×100％，N为处理组的藻细胞密度，N0为对照组的藻细胞密度。具体的抑制率的结果见图3。
由图3可知，罗汉果浸提液抑藻剂作用于铜绿微囊藻四天后，对铜绿微囊藻的抑制还有延时效应。
检测例4
取50ml的铜绿微囊藻液于100ml的锥形瓶中，然后向该锥形瓶中加入一定量的中草药抑藻剂作为处理组，然后分别在5天和9天后通过血球板计数法计算藻细胞密度，其中以50ml的铜绿微囊藻液作为对照组，抑藻率(IR)＝(1-N/N0)×100％，N为处理组的藻细胞密度，N0为对照组的藻细胞密度。
将罗汉果浸提液抑藻剂A1、B1和B2分别加入至不同的铜绿微囊藻液中(藻细胞的初始密度为2.6×106cells/mL)进行培养(罗汉果浸提液抑藻剂在铜绿微囊藻液中的质量分数均为0.3％)，测培养后的抑制率，其中，培养条件为：光照强度为4000lx，光暗比为12h：12h，温度为24-26℃，每天摇动的次数为3-5次。其中，空白组为不加罗汉果浸提液抑藻剂的铜绿微囊藻液。具体的抑制率结果见图4.
由图4可知，本发明提供的罗汉果浸提液抑藻剂的抑藻效果与细菌无关，且该罗汉果浸提液抑藻剂具有热稳定性。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
罗汉果浸提液抑藻剂及其制备方法和应用专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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