一种二氢蝶啶酮类BRD4蛋白抑制剂、制备方法及其应用

IPC分类号 : C07D475/00,A61P35/00,A61P35/02

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CN201811582864.3

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专利摘要

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种新的二氢蝶啶酮类BRD4蛋白抑制剂、它们的制备方法及用途，特别是作为BRD4蛋白抑制剂及抗肿瘤药物方面的用途。其结构通式如下：

权利要求

1.二氢蝶啶酮类化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，为如下化合物：

，，

。

2.如权利要求1所述二氢蝶啶酮类化合物或其药学上可接受的盐的应用，其特征在于，将其作为活性成分，制备胃癌或血癌药物。

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种二氢蝶啶酮类BRD4蛋白抑制剂、它们的制备方法、含有这些化合物的药用组合及它们的用途，特别是作为BRD4蛋白抑制剂及抗肿瘤药物方面的用途。

背景技术

恶性肿瘤是威胁我国人民群众健康的头号重大疾病。2017年国家癌症中心赫捷院士等发表的《中国癌症研究》发布了中国2013年的癌症数据。该报告指出癌症是我国城乡居民死亡的第一病因；癌症新发人数持续上升，2013年达368万人，占世界新发病例的1/4；全国每天约1万人确诊癌症。因此，抗肿瘤药物及其相关靶点抑制剂的研究具有重要的临床和社会价值。

BRD(Bromodomain),又称溴结构域蛋白，是一类能够特异性识别乙酰化赖氨酸残基的保守蛋白结构域，其对染色质组装和基因转录起着关键的调控作用。多项研究证明BRD是高度可适配的药物靶点，作用于BRD的小分子抑制剂在肿瘤治疗中有广阔的前景。

BRD4是溴结构域蛋白家族中的一员，其生物功能研究最为广泛和深入。BRD4不仅可以识别启动子区域，还可以识别基因间和基因内的区域，与基因表达有关。BRD4蛋白在生理状态下执行转录调节功能，调节正常的细胞进程；而在异常状态下，它们募集各种蛋白质到染色质和转录位点，调节与基因表达密切相关的基因如c-Myc和BCL-2的转录。以BRD4在细胞间期以正性转录延伸因子(positive transcription elongation factor，P-TEFb)依赖性方式募集蛋白质，并通过与RNA聚合酶Ⅱ偶联来调节转录过程，从而促进疾病相关的基因异常表达。

大量研究表明BRD4蛋白与肿瘤的发生发展具有密切关系，如BRD4的Bromodomain编码区与NUT(睾丸中的核蛋白)基因染色质异位形成BRD-NUT融合型原癌基因可导致中线癌；抑制黑色素瘤中的BRD4表达可明显减慢黑色素瘤细胞的生长；抑制恶性外周神经鞘膜瘤细胞中的BRD4表达，可导致该肿瘤细胞的死亡；抑制BRD4可抑制肝癌细胞的增殖；通过干扰BRD4与癌基因MYC的结合，在多种造血系统肿瘤，如AML、Burkitt淋巴瘤、多发性骨髓瘤及B细胞急性淋巴性白血病的模型中，可直接导致癌基因MYC的沉默。溴结构域蛋白可调控炎症基因表达的组蛋白乙酰化依赖性染色质复合物的组装并调节炎症基因的转录。研究表明BRD4可以充当NF-Kb的转录共激活因子而促进炎症的发生。在心血管疾病领域，BRD4也被发现心肌细胞肥大过程中起到病理基因反式激活的关键共激活剂作用，在心力衰竭中扮演着重要的角色；BRD4小分子抑制剂JQ1可能成为潜在的治疗心力衰竭的药物，改善心脏功能。

溴结构域蛋白家族在抗炎、抗肿瘤方面的潜在价值引起了全球各大制药公司和高校、科研机构的高度关注，BRD4也成为相关领域内的重要靶标。以BRD4为靶标，寻找其高活性、高选择性的小分子抑制剂成为当前治疗肿瘤、炎症、心血管疾病、艾滋病等疾病研究热点，具有广阔的开发应用前景。

目前，以JQ1为代表的多种BRD4小分子抑制剂已被报道，其相关化合物OTX-015、I-BET762、TEN-010已进入临床阶段研究。然而，目前进入临床阶段研究的BRD4小分子抑制剂并不多，迫切需要寻找更多的新型、高效的BRD4抑制剂，为肿瘤等疾病的治疗提供新选择。

发明内容

本发明目的在于提供一类新型具有二氢蝶啶酮结构的化合物及其制备方法，另一目的在于提供其作为抗肿瘤药物在抑制含溴结构域BRD4方面的应用。

具体技术方案如下：

本发明所述新型二氢蝶啶酮类化合物通式(I)如下所示：

R¹为烷基、芳基、杂环基；

烷基为含1-6个碳原子的直链或支链的饱和烃基，或具有3-6个碳原子的环状饱和烃基，或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基，其中各碳原子任选被氧取代；芳基选自苯基、苄基、萘基；杂环基选自哌啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、吲哚基，吗啉基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、哌嗪基、取代哌嗪基、吡嗪基或哒嗪基的单环杂环；各芳基及杂环基任选被1、2或3个取代基取代，各取代基独立地选自卤素、卤代烷基、烷基、氰基、羟基、硝基、巯基、烷氧基、烷硫基、芳烷基、二芳基烷基；

R²为氢、C1-C3烷基；

R³为烷基、芳基、杂环基；

烷基为含1-8个碳原子的直链或支链的饱和烃基，或具有3-8个碳原子的环状饱和烃基,或为连接具有1-8个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-8个碳原子的环状饱和烃基，其中各碳原子任选被氧、氮原子取代；芳基选自苯基、苄基、萘基；杂环基为选自哌啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、吗啉基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、哌嗪基、取代哌嗪基、吡嗪基或哒嗪基的单环杂环；或喹啉基、喹喔啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻吩基、苯并异噻吩基、苯并呋喃基、苯并二氧六环基、苯并二氧戊环基的双环杂环；各芳基、单环或双环杂环任选被1、2或3个取代基取代，各取代基独立地选自卤素、卤代烷基、烷基、氰基、羟基、巯基、氨基、硝基、烷氧基、烷硫基、芳烷基、二芳基烷基，或下列脂肪族杂环：四氢吡咯基、吗啉基、烷氧吗啉基、哌嗪基、哌啶基、烷氨基哌啶基；

本发明的优选方案在于：

R¹为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基、苄基、萘基、噻吩基，呋喃基，苯丙烯基，吲哚基，吡咯基、吡啶基；

R²为氢、甲基；

R³为苯基，甲基单取代的苯基，叔丁基单取代的苯基，卤素单取代的苯基，被羟基、甲氧基取代的苯基，卤素二取代的苯基，二甲氧基取代的苯基，羟基单取代的苯基，被羟基、卤素取代的苯基，被卤素、硝基取代的苯基，被乙氧基、羟基取代的苯基，被甲氧基单取代的苯基，被二乙氨基、羟基取代的苯基，被乙腈单取代的苯基，萘基，噻吩基，呋喃基，苯丙烯基，吲哚基，吡咯基，甲基单取代的噻吩基，羟基单取代的萘基，甲氧基单取代的呋喃基，吡啶基，甲基单取代的吡啶基，甲氧基单取代的吡啶基，氨基单取代的吡啶基，卤素单取代的吡啶基，卤素二取代的吡啶基，硝基单取代的吡啶基，卤素三取代的吡啶基。

优选方案在于：R¹为3-6个碳原子组成的环状饱和烃基；

R²为氢、甲基；

R³为苯基，取代的苯基，萘基，取代的萘基，噻吩基，取代的噻吩基，呋喃基，取代的呋喃基，苯丙烯基，吲哚基，取代的吲哚基，吡咯基，取代的吡咯基，吡啶基，取代的吡啶基；所述取代基选C1-3烷基，卤素，C1-3烷氧基，羟基，硝基，氨基，C1-3烷基取代的氨基，氰基。

更优选方案在于：R¹为环戊基；

R²为氢、甲基；

R³为苯基，甲基单取代的苯基，卤素单或双取代的苯基，甲氧基单或双取代的苯基，乙氧基单或双取代的苯基，氰基单取代的苯基，氨基单取代的苯基，被二乙氨基单取代的苯基；萘基，噻吩基，呋喃基，苯丙烯基，吲哚基，吡咯基，甲基单取代的噻吩基，吡啶基，甲基单取代的吡啶基，甲氧基单取代的吡啶基，氨基单取代的吡啶基，卤素单取代的吡啶基，硝基单取代的吡啶基。

本发明通式(I)优选以下结构化合物：

(E)-2-(2-亚苄基肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(2-甲基亚苄基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(3-甲基亚苄基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(2-氟苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(3-氟苯亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(4-氟苯亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,3-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,4-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,6-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(1-苯基亚乙基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(2-甲氧基亚苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(3-甲氧基亚苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(3,4-二甲氧基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(3-乙氧基-2-羟基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-2-(2-(4-(二乙氨基)-2-羟基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-((2-(8-环戊基-7-乙基-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-2-基)亚肼基)甲基)苯甲腈

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(萘-1-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((1E,2E)-3苯基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((1H-吲哚-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(噻吩-2-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((5-甲基噻吩-2-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(呋喃-2-基亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((1H-吡咯-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(吡啶-2-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((6-氯吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((5-甲基吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((6-甲基吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((4-氯吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-((6-甲氧基吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((5-氯吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(吡啶-3-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((2-氯吡啶-3-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-2-(2-((2-氨基吡啶-3-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(1-(吡啶-3-基)亚乙基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-((5-甲氧基吡啶-3-基)亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(吡啶-4-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(1-(吡啶-4-基)亚乙基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((3-硝基吡啶-4-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((4-甲基吡啶-2-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮

具体结构如表一所示：

表一.优选化合物结构

根据本发明，药学上可接受的盐包括通式(I)与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硼酸盐、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、苯磺酸、柠檬酸、乳酸、丙酮酸、酒石酸、乙酸、马来酸或琥珀酸、杏仁酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸。

其次，本发明提供了通式(I)所示化合物的制备方法。

本发明通式(I)化合物的制备方法，包括如下步骤：

a.将化合物1溶于甲醇中，冰浴下滴加二氯亚砜，回流反应，反应结束，将反应体系减压浓缩，析出产物，过滤后即得产物2，粗品不经纯化进行下步反应。产率约90％。

b.将中间体2溶于溶剂中，加入相应的羰基化合物，冰浴下加入适量的碱性化合物和还原剂，室温下搅拌至原料消失。反应结束后淬灭反应，经萃取，有机相合并后干燥、过滤、浓缩即得中间体3粗品，可不经纯化直接进行下步反应。产率70％。所用的溶剂可以是氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷；所用的碱性化合物可以是Na₂CO₃、K₂CO₃、CsCO₃、NaOAc、KOAc；所用的还原剂可以是NaBH₄、KBH₄、NaBH(OAc)₃、NaBH₃CN。

c.将中间体3溶于溶剂中，冰浴下加入2,4-二氯-5-硝基嘧啶及相应的碱性化合物，室温下搅拌至原料消失。反应结束后减压浓缩除去溶剂，经稀释、洗涤，有机层干燥后，硅胶柱层析分离得中间体4。产率85％。所用的溶剂可以是氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷；所用的碱性化合物可以是Na₂CO₃、K₂CO₃、CsCO₃、NaOAc、KOAc。

d.将中间体4溶于乙酸中并加热至50-70℃，分批还原铁粉，搅拌反应，升温至100℃-110℃继续反应。反应结束后，过滤，洗涤残渣，滤液浓缩后柱层析分离得中间体5。产率约60％。

e.将中间体5加入至无水DMF中，冰浴下加入碘甲烷(1.3当量)及NaH(1.3当量)。室温下搅拌反应，反应结束后淬灭反应体系，经萃取，有机相水洗、干燥、浓缩得中间体6，无需提纯可直接用于下步反应。产率90％。

f.将中间体6溶于乙醇中，加入水合肼溶液(2当量)，密闭后80℃-90℃下反应。反应结束后浓缩反应体系，经洗涤，干燥、浓缩后得中间体7，产物无需纯化可用于下步反应。产率87％。

g.将中间体7及相应的醛或酮溶于无水乙醇中，50℃～60℃下搅拌至原料不再减少。反应结束后减压浓缩除去溶剂，经水洗，干燥、浓缩柱层析纯化得目标产物8。产率80％。

本发明提供了通式(I)化合物对BRD4蛋白抑制及抗肿瘤活性方面的用途。

对部分通式(I)化合物进行了体外BRD4蛋白抑制活性的测试，结果如表二所示。

表二.本发明部分化合物BRD4蛋白抑制活性

对部分通式(I)化合物进行了体外肿瘤细胞的抑制活性的测试，结果如表三所示。

表三.本发明部分化合物体外抗肿瘤活性

注：JQ1为阳性对照；SGC、BGC、MGC、MKN45为胃癌细胞，THP1为白血病细胞

生物活性测试结果表明，本发明所提供的通式(I)化合物具有很好的BRD4蛋白抑制效果及很好的肿瘤细胞抑制效果。部分化合物对胃癌细胞的抑制活性达到或优于阳性对照化合物JQ1。

因此，本发明所涉及化合物可作为BRD4抑制剂用于BRD4介导的各种疾病的治疗中。本发明所涉及化合物可用于预防或治疗与BRD4相关的各种实质性器官肿瘤，包括但不限于胃癌、食管癌、肝癌、肾癌、肺癌、前列腺癌、血癌、淋巴癌等。

本发明优点在于:设计反应路线，通过七步反应得到目标化合物，总收率可达20％–25％。通过实验证实此类具有二氢蝶啶酮结构的新型化合物具有很好的BRD4蛋白抑制效果及很好的肿瘤细胞抑制效果，尤其是针对胃癌细胞，部分化合物的抑制活性达到或优于阳性对照化合物JQ1。将为BRD4抑制剂，肿瘤等疾病的治疗提供新的药物选择。

具体实施方式

以下结合实施例进一步描述本发明，这些实施例仅用于说明本发明并非限制本发明的范围。

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)和高分辨率质谱(HRMS)确定的。所用核磁共振仪为瑞典Bruker DPX-400型超导核磁共振仪，四甲基硅烷(TMS)为内标；所用高分辨质谱为Waters-Micromass公司Q-Tof质谱仪。

实施例1

2-氨基丁酸甲酯盐酸盐的制备：

将2-氨基丁酸(1.00g，1.0eq.)加入50mL茄形瓶中，加入无水甲醇15mL，0℃下缓慢加入SOCl₂(2.31g，2.0eq.)，加热回流1.5小时后，TLC显示反应完成。将挥发物蒸发后得到白色固体，用Et₂O研磨固体，抽滤后得到化合物2的粗产品可不经纯化直接进行下步反应，收率90％。

白色固体，熔点:120-122℃.¹H NMR(400MHz,D₂O)δ4.04(t,J＝6.2Hz,1H),3.76(s,3H),1.99–1.82(m,2H),0.97–0.87(m,3H).¹³C NMR(101MHz,D₂O)δ170.79,53.99,53.46,23.21,8.42.HR-MS(ESI):Calcd.C₅H₁₂ClNO₂,[M+H]⁺m/z:118.0863,found:118.0867.

实施例2

2-(环戊基氨基)丁酸甲酯的制备：

化合物2(1.00g，1.0eq.)和环戊酮(548mg，1.0eq.)冰浴10分钟，加入NaOAc(547mg，1.0eq.)和NaBH(OAc)₃(2.07g，1.5eq.)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示反应结束后，向反应体系中加入饱和的NaHCO₃溶液淬灭反应，然后用CH₂Cl₂(20mL×2)萃取水层，将有机层合并，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到化合物3，收率65％。

无色油状液体.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ3.63(s,3H),3.10(t,J＝6.6Hz,1H),2.98–

2.84(m,1H),1.80(s,1H),1.67–1.54(m,4H),1.54–1.48(m,2H),1.47–1.39(m,2H),1.32–1.21(m,2H),0.84(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ175.71,60.88,57.32,51.19,33.17,32.10,26.25,23.38,23.33,10.21.HR-MS(ESI):Calcd.C₁₀H₁₉NO₂,[M+H]⁺m/z:186.1494,found:186.1495.

实施例3

2-((2-氯-5-硝基嘧啶-4-基)(环戊基)氨基)丁酸甲酯的制备：

将化合物3(1.00g，1.0eq.)加入丙酮15mL，冰浴10分钟后加入2,4-二氯-5-硝基嘧啶(1.05g，1.0eq.)，再加入K₂CO₃(750mg，1.0eq.)，室温下搅拌过夜。反应完成后除去溶剂，用乙酸乙酯溶解残余物，并用水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥后，用硅胶快速柱色谱(PE/EA＝10:1)纯化得到化合物4，产率89％。

黄色固体，熔点:110-111℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ8.84(s,1H),4.29–4.14(m,1H),3.64(s,3H),3.52–3.48(m,1H),2.28–2.15(m,1H),2.04–1.90(m,2H),1.85–1.77(m,2H),1.72–1.61(m,3H),1.51–1.35(m,2H),0.94(t,J＝7.8Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ164.21,151.73,151.14,137.83,119.27,61.06,59.38,28.30,28.28,26.36,23.88,23.86,8.33.HR-MS(ESI):Calcd.C₁₄H₁₉ClN₄O₄,[M+Na]⁺m/z:365.0993,found:365.0992.

实施例4

2-氯-8-环戊基-7-乙基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

将化合物4(1.00g，1.0eq.)加入冰醋酸20mL，加热至70℃，在5分钟内分批加入铁粉(325mg，2.0eq.)。将反应物在70℃下搅拌1小时，然后升温至100℃反应4-5小时，反应完成后，将混合物用硅藻土过滤，用适当甲醇冲洗洗涤滤渣，蒸除挥发物后，用快速柱色谱(PE/EA＝1.5:1)纯化得到化合物5，产率50％。

黄色固体，熔点:180-182℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.85(s,1H),7.57(s,1H),4.30–4.20(m,1H),4.18–4.04(m,1H),2.00–1.76(m,7H),1.76–1.65(m,1H),1.62–1.42(m,2H),0.92–0.68(m,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ164.21,151.73,151.14,137.83,119.27,61.06,59.38,28.30,28.28,26.36,23.88,23.86,8.33.HR-MS(ESI):Calcd.C₁₃H₁₇ClN₄O,[M+Na]⁺m/z:303.0989,found:303.0975.

实施例5

2-氯-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备:

将化合物5(1.00g，1.0eq.)加入无水DMF，冰浴10分钟后，加入碘甲烷(657mg，1.3eq.)，和质量百分含量为60％的NaH(185mg，1.3eq.)室温下搅拌3小时，反应完成后，用冰水淬灭反应体系，用EtOAc提取产物，有机层用水洗涤两次，用无水硫酸钠干燥后旋干得到化合物6无需纯化直接投下一步，产率90％。

黄色固体，熔点:182-183℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ7.87(s,1H),4.39–4.31(m,1H),4.17(p,J＝8.3Hz,1H),3.24(s,3H),1.97–1.77(m,7H),1.74–1.65(m,1H),1.61–1.48(m,2H),0.74(t,J＝7.5Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ163.16,152.13,151.53,138.49,121.24,60.76,59.32,28.38,28.33,27.91,26.61,23.85,23.81,8.48.HR-MS(ESI):

Calcd.C₁₄H₁₉ClN₄O,[M+H]⁺m/z:295.1325,found:295.1322.

实施例6

8-环戊基-7-乙基-2-肼基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备:

将化合物6(1.00g，1.0eq.)溶于乙醇中，加入质量百分含量为50％的水合肼(678mg，2eq.)，90℃下用水热反应釜反应48小时，反应完成后，蒸除易挥发物，用乙酸乙酯溶解，加水洗涤后，有机相干燥后旋干得到化合物7，无需纯化直接投下一步，产率70％。

白色固体，熔点:120-121℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ7.68(s,1H),7.42(s,1H),4.35–4.21(m,1H),4.17–4.10(m,1H),4.04(s,2H),1.97–1.68(m,7H),1.64–1.47(m,3H),0.75(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.80,160.49,151.56,138.60,114.30,60.21,58.19,28.73,28.61,27.68,26.17,23.48,23.31,8.90.HR-MS(ESI):Calcd.C₁₄H₂₂N₆O,[M+H]⁺

m/z:291.1933,found:291.1934.

实施例7

(E)-2-(2-亚苄基肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

将化合物7(100mg，1.0eq.)、苯甲醛(40mg，1.1eq.)加入无水乙醇8mL，60℃下反应8小时，TLC(1:2PE/EA)检测，反应完全后柱层析纯化(1:1PE/EA)得到化合物8，收率69％。白色固体，熔点:162-163℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.73(s,1H),8.06(s,1H),7.76(s,1H),7.63(d,J＝7.3Hz,2H),7.39(t,J＝7.4Hz,2H),7.31(t,J＝7.3Hz,1H),4.26–4.19(m,1H),4.16–4.05(m,1H),3.23(s,3H),2.18–2.08(m,1H),2.08–1.85(m,5H),1.85–1.75(m,1H),1.73–1.63(m,1H),1.62–1.47(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.93,155.21,151.36,139.31,138.52,135.72,128.58,128.35,125.89,115.62,61.57,59.54,28.67,28.55,27.64,26.25,23.96,23.86,8.70.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₆N₆O,[M+H]⁺m/z:379.2446,found:379.2447.

实施例8

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(2-甲基亚苄基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2-甲基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7,收率71％。

白色固体，熔点:231-232℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.66(s,1H),8.33(s,1H),7.81–7.75(m,2H),7.21(t,J＝4.3Hz,3H),4.24–4.20(m,1H),4.17–4.09(m,1H),3.23(s,3H),2.42(s,3H),2.08(d,J＝11.2Hz,1H),2.00–1.89(m,5H),1.82–1.75(m,1H),1.71–1.64(m,1H),1.60–1.49(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.92,155.25,151.44,138.57,138.20,135.35,133.55,130.68,128.04,125.83,125.16,115.57,61.30,59.34,28.58,28.53,27.65,26.26,23.72,23.65,19.20,8.72.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₈N₆O,[M+H]⁺m/z:393.2403,found:393.2404.

实施例9

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(3-甲基亚苄基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用3-甲基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率70％。

白色固体，熔点:220-222℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.84(s,1H),8.03(s,1H),7.72(s,1H),7.52(s,1H),7.40(d,J＝7.7Hz,1H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.4Hz,1H),4.27–4.23(m,1H),4.14–4.05(m,1H),3.23(s,3H),2.33(s,3H),2.19–2.10(m,1H),2.07–1.89(m,5H),1.84–1.78(m,1H),1.73–1.66(m,1H),1.61–1.50(m,1H),0.76(t,J＝7.4Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.90,154.58,151.45,140.09,137.69,135.45,129.27,128.49,126.19,123.67,115.66,61.67,59.78,28.60,28.47,27.69,26.32,23.98,23.85,20.91,8.62.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₈N₆O,[M+H]⁺m/z:393.2403,found:393.2402.

实施例10

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(2-氟苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备:

使用2-氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率70％。

白色固体，熔点:162-163℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.92(s,1H),8.28(s,1H),7.95–7.83(m,1H),7.77(s,1H),7.45–7.32(m,1H),7.30–7.20(m,2H),4.28–4.19(m,1H),4.16–4.05(m,1H),3.24(s,3H),2.16–2.08(m,1H),2.06–1.89(m,5H),1.84–1.76(m,1H),1.73–1.64(m,1H),1.61–1.49(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.95,161.22,158.75,155.00,151.36,138.46,131.64,131.59,130.02,129.94,115.86,115.67,61.58,59.59,28.63,28.50,27.65,26.27,23.95,23.83,8.67.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₅FN₆O,[M+H]⁺m/z:397.2152,found:397.2153.

实施例11

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(3-氟苯亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用3-氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率74％。

白色固体，熔点:181-183℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.88(s,1H),8.04(s,1H),7.76(s,1H),7.51–7.37(m,3H),7.18–7.08(m,1H),4.27–4.22(m,1H),4.11–4.02(m,1H),3.24(s,3H),2.20–2.12(m,1H),2.08–1.88(m,5H),1.83–1.76(m,1H),1.72–1.65(m,1H),1.61–1.50(m,2H),0.76(t,J＝7.5Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ163.69,162.97,161.27,155.03,151.34,138.47,138.42,137.70,130.65,130.57,122.51,115.81,115.08,114.87,111.42,111.20,61.78,59.79,28.60,28.44,27.63,26.27,24.00,23.82,8.64.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₅N₆O,[M+H]⁺m/z:397.2152,found:397.2151.

实施例12

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(4-氟苯亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用4-氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率74％。

白色固体，熔点:210-212℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.72(s,1H),8.05(s,1H),7.75(s,1H),7.71–7.62(m,2H),7.23(t,J＝8.9Hz,2H),4.24–4.20(m,1H),4.17–4.08(m,1H),3.24(d,J＝4.4Hz,3H),2.15–1.88(m,6H),1.83–1.75(m,1H),1.72–1.63(m,1H),1.61–1.47(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ163.32,162.94,160.88,155.19,151.38,138.50,138.25,132.31,132.28,127.82,127.74,115.69,115.64,115.47,61.47,59.45,28.67,28.56,27.65,26.26,23.93,23.84,8.70.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₅FN₆O,[M+H]⁺m/z:397.2154,found:397.2155.

实施例13

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,3-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备:

使用2,3-二氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率73％。

白色固体，熔点:151-152℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ11.04(s,1H),8.26(s,1H),7.78(s,1H),7.69(t,J＝7.0Hz,1H),7.42–7.31(m,1H),7.27–7.18(m,1H),4.28–4.21(m,1H),4.16–4.04(m,1H),3.24(s,3H),2.17–1.88(m,6H),1.84–1.76(m,1H),1.72–1.64(m,1H),1.62–1.50(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.96,154.81,151.36,138.39,130.46,125.72,125.65,124.72,120.46,116.58,116.41,116.07,61.54,59.59,28.59,28.47,27.66,26.29,23.92,23.80,8.66.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₄F₂N₆O,[M+H]⁺m/z:415.2058,found:415.2058.

实施例14

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,4-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2,4-二氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率80％

白色固体，熔点:181-182℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.91(s,1H),8.22(s,1H),7.95–7.88(m,1H),7.76(s,1H),7.34–7.26(m,1H),7.16(t,J＝8.5Hz,1H),4.27–4.20(m,1H),4.15–4.07(m,1H),3.23(s,3H),2.13–1.88(m,6H),1.82–1.75(m,1H),1.71–1.63(m,1H),1.55(d,J＝13.5Hz,2H),0.76(t,J＝7.5Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.94,154.98,151.36,138.46,130.92,126.54,120.11,115.88,112.35,112.13,104.46,104.21,61.50,59.50,28.64,28.53,27.65,26.27,23.93,23.83,8.68.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₄F₂N₆O,[M+H]⁺m/z:

415.2058,found:415.2059.

实施例15

(E)-8-环戊基-2-(2-(2,6-二氟苯亚甲基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2,6-二氟苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率80％。

白色固体，熔点:238-240℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.91(s,1H),8.19(s,1H),7.77(s,1H),7.44–7.33(m,1H),7.19–7.08(m,2H),4.25–4.19(m,1H),4.19–4.09(m,1H),3.24(s,3H),2.03–1.84(m,6H),1.82–1.75(m,1H),1.69–1.62(m,1H),1.50(t,J＝12.9Hz,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.96,161.18,161.11,158.67,158.60,154.90,151.53,138.48,129.81,129.70,129.17,115.99,112.91,112.77,112.63,112.15,112.09,111.90,60.90,59.11,28.53,28.50,27.67,26.26,23.40,8.75.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₁H₂₄F₂N₆O,[M+H]⁺m/z:415.2058,found:415.2057.

实施例16

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(1-苯基亚乙基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用苯乙酮替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％。

白色固体，熔点:166-167℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ9.55(s,1H),7.82(d,J＝7.1Hz,2H),7.78(s,1H),7.37(t,J＝7.3Hz,2H),7.32(d,J＝7.0Hz,1H),4.26–4.21(m,1H),4.16–4.07(m,1H),3.24(s,3H),2.27(s,3H),2.15(d,J＝11.1Hz,1H),2.02–1.88(m,5H),1.82–1.76(m,1H),1.72–1.65(m,1H),1.58–1.47(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.98,156.02,151.51,143.84,139.09,138.39,128.04,127.92,125.47,115.71,61.42,59.59,28.49,28.40,27.65,26.25,23.57,23.41,12.97,8.69.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₈N₆O,[M+H]⁺m/z:393.2403,found:393.2402.

实施例17

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(2-甲氧基亚苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2-甲氧基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:220-222℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.72(s,1H),8.38(s,1H),7.88–7.82(m,1H),7.74(s,1H),7.34–7.26(m,1H),7.05(d,J＝8.2Hz,1H),6.96(t,J＝7.5Hz,1H),4.24–4.18(m,1H),4.12–4.03(m,1H),3.84(s,3H),3.23(s,3H),2.20–2.08(m,1H),2.07–1.86(m,5H),1.83–1.75(m,1H),1.71–1.63(m,1H),1.60–1.48(m,2H),0.82–0.71(m,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.95,156.78,155.25,151.33,138.48,134.82,129.65,124.67,123.80,120.45,115.50,111.58,61.68,59.64,55.52,28.64,28.50,27.63,26.23,23.97,23.84,8.68.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₈N₆O₂,[M+H]⁺m/z:409.2352,found:409.2352.

实施例18

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(3-甲氧基亚苄基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用3-甲氧基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:181-182℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.75(s,1H),8.02(s,1H),7.76(s,1H),7.30(t,J＝7.9Hz,1H),7.21(s,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),6.94–6.86(m,1H),4.26–4.21(m,1H),4.16–4.08(m,1H),3.79(s,3H),3.23(s,3H),2.14–1.88(m,6H),1.83–1.76(m,1H),1.68(d,J＝7.1Hz,1H),1.59–1.47(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.93,159.50,155.19,151.40,139.27,138.53,137.14,129.64,119.00,115.61,114.51,110.07,61.47,59.44,54.98,28.70,28.63,27.64,26.24,23.97,23.87,8.71.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₈N₆O₂,[M+H]⁺m/z:409.2352,found:409.2351.

实施例19

(E)-8-环戊基-2-(2-(3,4-二甲氧基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用3,4-二甲氧基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:167-168℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.59(s,1H),7.99(s,1H),7.75(s,1H),7.28(d,J＝1.7Hz,1H),7.11–7.02(m,1H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),4.24–4.15(m,2H),3.80(s,2H),3.78(s,2H),3.23(s,3H),2.08–1.88(m,6H),1.81–1.74(m,1H),1.69–1.62(m,1H),1.59–1.47(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.89,155.35,151.46,149.48,148.98,139.85,138.58,128.49,120.22,115.33,111.50,107.64,61.24,59.14,55.48,55.24,28.77,27.64,26.22,23.94,23.90,8.75.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₃H₃₀N₆O3,

[M+H]⁺m/z:439.2457,found:439.2458.

实施例20

(E)-8-环戊基-2-(2-(3-乙氧基-2-羟基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2-羟基-3-乙氧基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:178-180℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ11.98(s,1H),11.07(s,1H),8.20(s,1H),7.81(s,1H),6.93(t,J＝8.1Hz,2H),6.78(t,J＝7.8Hz,1H),4.54–4.36(m,1H),4.25–4.20(m,1H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.25(s,3H),2.05(d,J＝8.1Hz,1H),1.96–1.71(m,7H),1.70–1.60(m,3H),1.33(t,J＝7.0Hz,3H),0.77(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.83,154.72,151.84,147.45,146.93,141.24,138.68,121.34,119.46,118.48,115.91,114.86,28.82,28.32,27.75,26.46,22.66,22.48,14.82.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₃H₃₀N₆O₃,[M+H]⁺m/z:439.2457,found:439.2458.

实施例21

(E)-8-环戊基-2-(2-(4-(二乙氨基)-2-羟基亚苄基)肼基)-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用2-羟基-4-二乙胺基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

黄色固体，熔点:223-225℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ11.80(s,1H),10.63(s,1H),8.06(s,1H),7.78(s,1H),7.03(d,J＝8.7Hz,1H),6.28–6.16(m,1H),6.07(d,J＝2.3Hz,1H),4.48–4.32(m,1H),4.24–4.12(m,1H),3.23(s,3H),2.06–1.98(m,1H),1.94(d,J＝16.1Hz,1H),1.87–1.70(m,5H),1.67–1.55(m,3H),1.09(t,J＝7.0Hz,6H),0.77(t,J＝7.5Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.79,158.98,155.01,151.88,148.92,143.04,138.86,130.57,

115.35,107.49,103.21,97.84,59.52,57.83,43.67,28.87,28.55,27.73,26.29,22.99,22.73,12.54,8.96.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₅H₃₅N₇O₂,[M+H]⁺m/z:466.2930,found:466.2929.

实施例22

(E)-2-((2-(8-环戊基-7-乙基-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-2-基)亚肼基)甲基)苯甲腈的制备：

使用2-乙腈基苯甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:155-156℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ11.20(s,1H),8.41(s,1H),8.06(d,J＝8.0Hz,1H),7.83(d,J＝7.7Hz,1H),7.79(s,1H),7.71(t,J＝7.6Hz,1H),7.48(t,J＝7.6Hz,1H),4.27–4.22(m,1H),4.18–4.10(m,1H),3.24(s,3H),2.16–1.88(m,6H),1.83–1.76(m,1H),1.72–1.65(m,1H),1.57(d,J＝11.5Hz,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.99,154.68,151.38,138.60,138.38,134.33,133.15,133.08,128.56,124.58,117.32,116.26,109.24,61.43,59.51,28.56,28.47,27.68,26.31,23.86,23.75,8.66.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₂H₂₅N₇O,[M+H]⁺m/z:404.2199,found:404.2198.

实施例23

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(萘-1-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用1-萘甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％

白色固体，熔点:157-159℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.82(s,1H),9.02–8.93(m,1H),8.72(s,1H),8.01–7.95(m,1H),7.91(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(t,J＝3.2Hz,2H),7.62–7.52(m,3H),4.38–4.31(m,1H),4.26–4.20(m,1H),3.26(s,3H),2.08–1.87(m,6H),1.82–1.75(m,1H),1.70–1.63(m,1H),1.62–1.54(m,2H),0.79(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.91,155.33,151.69,139.42,138.73,133.64,130.81,129.87,128.82,128.63,126.63,126.21,126.00,125.52,124.54,115.74,60.50,58.60,28.82,28.74,27.71,26.28,23.65,23.54,8.88.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₅H₂₈N₆O,[M+H]⁺m/z:429.2403,found:429.2402.

实施例24

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((1E,2E)-3苯基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用肉桂醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率81％。

黄色固体，熔点:167-169℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.65(s,1H),7.90(d,J＝9.1Hz,1H),7.74(s,1H),7.54(d,J＝7.4Hz,2H),7.37(t,J＝7.6Hz,2H),7.27(t,J＝7.3Hz,1H),6.99–6.90(m,1H),6.80(d,J＝16.1Hz,1H),4.33–4.25(m,1H),4.20–4.16(m,1H),3.23(s,3H),2.00–1.84(m,6H),1.78–1.71(m,1H),1.68–1.61(m,1H),1.60–1.50(m,2H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.87,155.03,151.49,141.97,138.65,136.50,134.27,128.73,127.96,126.56,126.48,115.72,60.31,58.34,28.79,28.73,27.71,26.31,23.65,23.43,8.88.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₃H₂₈N₆O,[M+H]⁺m/z:405.2403,found:405.240.

实施例25

(E)-2-(2-((1H-吲哚-2-基)亚甲基)肼基)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用1H-吲哚-2-甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率60％。

白色固体，熔点：177-179℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ11.33(s,1H),10.37(s,1H),8.41(d,J＝7.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.78(s,1H),7.62(d,J＝2.5Hz,1H),7.40(d,J＝8.1Hz,1H),7.17(t,J＝7.5Hz,1H),7.05(t,J＝7.3Hz,1H),4.59–4.46(m,1H),4.23–4.16(m,1H),3.24(s,3H),2.17–2.08(m,1H),2.03(s,1H),1.93–1.73(m,5H),1.70–1.56(m,3H),0.79(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.81,155.95,151.95,139.02,137.19,136.96,127.70,124.39,122.27,122.11,119.55,114.75,112.80,111.54,59.62,57.80,28.99,28.66,27.70,26.23,23.06,22.81.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₃H₂₇N₇O,[M+H]⁺m/z:418.2355,found:418.2354.

实施例26

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-(噻吩-2-基亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用噻吩-2-甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率60％。

白色固体，熔点:181-182℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.69(s,1H),8.25(s,1H),7.74(s,1H),7.50(d,J＝5.0Hz,1H),7.23(d,J＝2.8Hz,1H),7.11–6.99(m,1H),4.25–4.17(m,1H),4.14–4.03(m,1H),3.22(s,3H),2.13–1.89(m,6H),1.83–1.75(m,1H),1.70–1.64(m,1H),1.57(s,1H),0.75(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.92,155.03,151.34,140.77,138.49,134.80,127.56,127.49,126.54,115.54,61.59,59.62,28.67,28.53,27.63,26.25,24.08,23.93,8.69.HR-MS(ESI):Calcd.C₁₉H₂₄N₆OS,[M+H]⁺m/z:385.1810,found:385.1809.

实施例27

(E)-8-环戊基-7-乙基-5-甲基-2-(2-((5-甲基噻吩-2-基)亚甲基)肼基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用5-甲基噻吩-2-甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率60％。

白色固体，熔点:177-178℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.59(s,1H),8.15(s,1H),7.73(s,1H),7.01(d,J＝3.5Hz,1H),6.79–6.68(m,1H),4.24–4.18(m,1H),4.13–4.04(m,1H),3.22(s,3H),2.43(s,3H),2.12–1.87(m,6H),1.83–1.75(m,1H),1.72–1.62(m,1H),1.60–1.48(m,2H),0.75(t,J＝7.4Hz,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d⁶)δ162.91,155.09,151.33,140.19,138.55,138.51,135.16,127.81,125.82,115.42,61.52,59.54,28.68,28.55,27.63,26.24,24.06,23.92,15.26,8.70.HR-MS(ESI):Calcd.C₂₀H₂₆N₆OS,[M+H]⁺m/z:399.1967,found:399.1968.

实施例28

(E)-8-环戊基-7-乙基-2-(2-(呋喃-2-基亚甲基)肼基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮的制备：

使用呋喃-2-甲醛替代苯甲醛，方法同实施例7，收率60％。

白色固体，熔点:181-183℃.¹H NMR(400MHz,DMSO-d⁶)δ10.68(s,1H),7.99(s,1H),7.73(d,J＝9.1Hz,2H),6.66(d,J＝3.2Hz,1H),6.62–6.51(m,1H),4.24–4.14(m,2H),3.23(s,3H),2.00(d,J＝2.0

一种二氢蝶啶酮类BRD4蛋白抑制剂、制备方法及其应用专利购买费用说明