专利摘要

专利摘要

本公开提供了一种阿奇霉素类化合物及制备方法与应用，其化学结构式如式Ⅰ所示其中，R为三氮唑、取代的三氮唑、氧基苯基或者取代的氧基苯基。本公开提供的阿奇霉素类化合物有利于增强与作用位点的结合，并且具有较好的抗敏感菌和耐药菌的活性。

权利要求

1.一种阿奇霉素类化合物，其特征是，化学结构式如式Ⅰ所示

其中，R为R2为R3为H、卤素、胺基或C1-C5烷基。

2.如权利要求1所述的阿奇霉素类化合物，其特征是，R为选自：

3.一种阿奇霉素类化合物，其特征是，化学结构式如式Ⅰ所示

其中,R选自

4.一种权利要求1～3任一所述的阿奇霉素类化合物的制备方法，其特征是，包括以式1为起始原料按照以下反应路线制备式Ⅰ所示化合物：

其中，所述取代原料为叠氮钠与苯乙炔的组合或叠氮钠与取代苯乙炔的组合。

5.如权利要求4所述的阿奇霉素类化合物的制备方法，其特征是，起始原料1的C-2'的羟基与乙酸衍生物进行酯化反应获得中间体2，中间体2与N,N'-羰基二咪唑进行反应获得中间体3，中间体3与肼反应获得中间体4，中间体4与氯代乙酰氯进行取代反应获得中间体5，中间体5与取代原料进行反应获得式Ⅰ所示化合物。

6.如权利要求5所述的阿奇霉素类化合物的制备方法，其特征是，中间体5与叠氮钠进行取代反应获得中间体7，中间体7与苯乙炔或由R3取代的苯乙炔进行环化加成反应获得化合物8；

中间体7的结构式为

化合物8的结构式为

7.一种药物组合物，其特征是，含有权利要求1～3任一所述的阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐。

8.一种药物制剂，其特征是，包括权利要求1～3任一所述的阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐或权利要求7所述的上述药物组合物和药学上可接受的辅料和/或载体。

9.一种权利要求1～3任一所述的阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐、权利要求7所述的药物组合物或权利要求8所述的药物制剂在制备抗青霉素耐药金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC31007)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC43300)药物的应用。

说明书

技术领域

本公开涉及有机化合物及医药技术领域，涉及一种阿奇霉素类化合物及制备方法与应用。

背景技术

这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。

1928年，英国细菌学家弗莱明发现了世界上第一种抗生素类抗菌药物—青霉素。随后，各类天然或半合成抗生素相继问世，其中包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、氯霉素类、大环内酯类抗生素。此外，以环丙沙星、诺氟沙星为代表的喹诺酮类化学治疗药也先后涌入市场。20世纪抗菌药物，特别是抗生素类药物的蓬勃发展为各种细菌感染性疾病提供了丰富的治疗方案，有力推动了人类进步和社会发展。然而，近年来由于抗生素的滥用，细菌的耐药现象空前泛滥。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌、多药耐药肺炎链球菌、多重抗药性结核杆菌的传播严重制约了感染性疾病临床治疗方案的选择，对于免疫功能缺陷患者，甚至可能导致治疗的失败。因此，新型抗耐药菌抗生素的发现是当今新药研究、开发领域的热点。

大环内酯，作为一类天然或半合成的抗生素，不仅具有优良的抗菌活性，而且在临床用药时耐受性好、极少发生青霉素类药物的过敏性反应，因而在呼吸道感染、软组织感染的临床治疗中具有重要的地位。近年来，随着分子生物学的发展，针对大环内酯母核的半合成结构修饰不断涌现出显著的成果，业已引起全球的普遍关注，并成为抗耐药菌抗生素研究与开发的主导力量之一。

发明内容

本公开的目的是提供一种阿奇霉素类化合物及制备方法与应用，该类化合物有利于增强与作用位点的结合，并且具有较好的抗敏感菌和耐药菌的活性。

为了实现上述目的，本公开的技术方案为：

第一方面，本公开提供了一种阿奇霉素类化合物，其化学结构式如式Ⅰ所示

其中，R为三氮唑、取代的三氮唑、氧基苯基或者取代的氧基苯基。

第二方面，本公开提供了一种上述阿奇霉素类化合物的制备方法，包括以起始原料1为起始原料按照以下反应路线制备式Ⅰ所示化合物：

其中，所述取代原料为苯酚、取代苯酚、叠氮钠与苯乙炔的组合或叠氮钠与取代苯乙炔的组合，R为三氮唑、取代的三氮唑、氧基苯基或者取代的氧基苯基。

第三方面，本公开提供了一种药物组合物，含有上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐。

第四方面，本公开提供了一种药物制剂，包括上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐或含有上述药物组合物和药学上可接受的辅料和/或载体。

第五方面，本公开提供了一种上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐、药物组合物或药物制剂在制备抗菌药物的应用。

本公开的有益效果为：

1.本公开的阿奇霉素类化合物中的C-2'、C-3'分别保留了羟基和二甲氨基，从而保证了化合物的抗敏感菌活性。

2.本公开的阿奇霉素类化合物中在C-4”引入芳基氨基甲酸酯基团，不仅增强该结构片段与作用位点的结合，而且增强了化合物的抗耐药菌活性。

3.本公开在的阿奇霉素类化合物中在C-11,12位引入环碳酸酯结构，以提高AZM母核的稳定性、改善目标化合物的体内抗菌活性。

4.本公开在的阿奇霉素类化合物具有良好的抗敏感菌和耐药菌的活性。例如化合物B13对C.albicans ATCC10231的活性比对照药阿奇霉素和克拉霉素提高了64倍。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

正如背景技术所介绍的，抗生素滥用导致细菌耐药现象空前泛滥的现象，本公开提供了供一种阿奇霉素类化合物及制备方法与应用。

本公开的一种典型实施方式，提供了一种阿奇霉素类化合物，其化学结构式如式Ⅰ所示

其中，R为三氮唑、取代的三氮唑、氧基苯基或者取代的氧基苯基。

该实施方式的一种或多种实施例中，所述R为 其中，R1为H、卤素或C1-C4烷基，R2为苯基或取代苯基。

该系列实施例中，R1为F。

该系列实施例中，R2为 其中，R3为H、卤素、胺基、烷氧基或C1-C5烷基。

该系列实施例中，R为选自：

本公开的另一种实施方式，提供了一种上述阿奇霉素类化合物的制备方法，包括以起始原料1为起始原料按照以下反应路线制备式Ⅰ所示化合物：

其中，所述取代原料为苯酚、取代苯酚、叠氮钠与苯乙炔的组合或叠氮钠与取代苯乙炔的组合，R为三氮唑、取代的三氮唑、氧基苯基或者取代的氧基苯基。

该实施方式的一种或多种实施例中，起始原料1的C-2'的羟基与乙酸衍生物进行酯化反应获得中间体2，中间体2与N,N'-羰基二咪唑(CDI)进行反应获得中间体3，中间体3与与肼反应获得中间体4，中间体4与氯代乙酰氯进行取代反应获得中间体5，中间体5与取代原料进行反应获得式Ⅰ所示化合物。

该系列实施例中，中间体5与苯酚或取代苯酚进行取代反应获得化合物6；

化合物6的结构式为

该系列实施例中，中间体5与叠氮钠进行取代反应获得中间体7，中间体7与苯乙炔或取代苯乙炔进行环化加成反应获得化合物8；

中间体7的结构式为

化合物8的结构式为

具体的，起始原料1制备中间体2的过程为：将起始原料1(阿奇霉素)溶解于无水DCM，加入乙酸酐和无水三乙胺，室温反应24h，反应完毕后，加入适量饱和NaHCO3溶液、DCM萃取、合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压旋干，Me2CO-H2O(2:1)重结晶得中间体2。

具体的，中间体2制备中间体3的过程为：将中间体2溶解于无水甲苯，加入无水三乙胺和CDI，55℃下反应72h。反应完毕后，减压浓缩，加入适量饱和NaHCO3溶液，DCM萃取。合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH＝15:1)得中间体3。

具体的，中间体3制备中间体4的过程为：将中间体3溶解于DMF，加入85％水合肼，室温搅拌0.5h，反应完毕后，加入水和EtOAc分液萃取，将有机层采用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得中间体4。

具体的，中间体4制备中间体5的过程为：将中间体4溶解于无水DCM，加入三乙胺，冰浴下，氯代乙酰氯缓慢滴加至上述反应液中，滴毕，室温搅拌4h，反应完毕后，水分液萃取，DCM萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝20:1:0.1)得中间体5。

具体的，中间体5制备化合物6的过程为：将5溶解于乙腈，加入苯酚或取代苯酚，以碳酸钾为傅酸剂，60℃搅拌0.5h。反应完毕后，浓缩反应液。水和DCM分液萃取，DCM萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝20:1:0.1)得淡黄色固体。溶解于甲醇，55℃搅拌12h，反应完毕后，浓缩反应液，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得化合物6。

具体的，中间体5制备中间体7的过程为：将中间体5溶解于DMF和水，加入叠氮钠，80℃搅拌48h，反应完毕后，水和EtOAc分液萃取，将有机层采用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤、减压浓缩得中间体7。

具体的，中间体7制备化合物8的过程为：将中间体7溶于75％的甲醇中，再加入CuSO4、抗坏血酸钠和苯乙炔或取代苯乙炔，55℃下反应24h，反应完全后，减压浓缩反应液，向反应液中二氯甲烷，二氯甲烷萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得化合物8。

本公开的第三种实施方式，提供了一种药物组合物，含有上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐。

所述药学上可接受的盐，例如盐酸盐、磷酸盐、硫酸盐、枸橼酸盐等。

本公开的第四种实施方式，提供了一种药物制剂，包括上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐或含有上述药物组合物和药学上可接受的辅料和/或载体。

本公开所述的药物剂型可以为口服液剂、胶囊剂、片剂、注射剂等。

本公开所述辅料，例如片剂中的黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂，液体制剂中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等。

本公开所述载体，例如离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白、甘油、山梨醇、水、盐等。

本公开的第五种实施方式，提供了一种上述阿奇霉素类化合物或其药学上可接受的盐、药物组合物或药物制剂在制备抗菌药物的应用。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本公开的技术方案。

实施例1：中间体2的合成。

将起始原料1(阿奇霉素,3.0g,3.30mmol)溶解于无水DCM(30mL)，加入乙酸酐(0.75mL)和无水三乙胺(2.22mL，16.02mmol)，室温搅拌24h。反应完毕后，加入适量饱和NaHCO3溶液，DCM(25mL×2)萃取。合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压旋干，Me2CO-H2O(2:1)重结晶得白色泡沫状固体的中间体2(2.9g,91.48％)。

实施例2：中间体3的合成。

将中间体2(3.0g,3.80mmol)溶解于无水甲苯(40mL)，加入无水三乙胺(1.20mL,8.66mmol)和CDI(2.46g,15.2mmol)，55℃下搅拌72h。反应完毕后，减压浓缩，加入适量饱和NaHCO3溶液，DCM(25mL×2)萃取。合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH＝15:1)得白色泡沫状固体的中间体3(3.0g,86.71％)。

实施例3：中间体4的合成。

将中间体3(3.0g,3.29mmol)溶解于DMF(20mL)，加入85％水合肼(0.29g,4.95mmol)，室温搅拌0.5h。反应完毕后，水(20mL)和EtOAc(25mL)分液萃取。有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得白色泡沫状固体的中间体4(2.33g,80.90％)。MS(ESI)m/z calcd for C42H74N4O15[M+H]+:875.52,found:875.7,[M+2H]2+/2:438.3,found:438.6.

实施例4：中间体5的合成。

将中间体4(2.5g,2.86mmol)溶解于无水DCM(20mL)，加入三乙胺(0.58g,5.72mmol)。冰浴下，氯代乙酰氯(0.48g,4.29mmol)缓慢滴加至上述反应液中。滴毕，室温搅拌4h。反应完毕后，水(20mL)分液萃取，DCM(25mL×2)萃取。合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝20:1:0.1)得红棕色泡沫状固体的中间体5(2.1g,77.21％)。MS(ESI)m/z calcd for C44H75ClN4O16[M+H]+:951.49,found:951.6,[M+2H]2+/2:476.2,found:476.4.

实施例6：A1的合成。

将中间体5(150mg,0.16mmol)溶解于乙腈(20mL)，加入苯酚(151mg,1.6mmol)和碳酸钾(442mg,3.2mmol)。60℃搅拌0.5h。反应完毕后，浓缩反应液。水(20mL)和DCM(25mL×2)分液萃取，DCM(25mL×2)萃取。合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压旋干，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝20:1:0.1)得淡黄色固体6。6溶解于甲醇(20mL)，55℃搅拌12h。反应完毕后，浓缩反应液。柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得淡黄色固体A1(43mg,28.22％以两步计)。Mp:118–120℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.72-7.34(m,2H),7.22-7.08(m,2H),7.02-6.99(m,1H),5.09-5.02(m,1H),4.92-4.85(m,1H),4.67-4.66(m,1H),4.48-4.20(m,4H),3.74-3.71(m,1H),3.51-3.49(m,2H),3.35-3.28(m,3H),3.10(s,1H),2.83-2.77(m,2H),2.47-2.34(m,2H),2.23-2.19(m,3H),2.07-1.98(m,3H),1.91-1.81(m,2H),1.49-1.43(m,5H),1.33-1.31(m,3H),1.28-1.26(m,12H),1.21-1.17(m,6H),1.07-1.06(m,2H),1.00-0.96(m,6H),0.93-0.88(m,8H),0.69-0.65(m,3H)；MS(ESI)m/z calcdfor C48H78N4O16[M+H]+:967.54,found:967.7,[M+2H]2+/2:484.3,found:484.6.

实施例7：A2的合成。

合成过程与实施例6相同，以2-氟苯酚代替苯酚，获得淡黄色固体A2(17mg,10.94％,以两步计),Mp:124–126℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.71-7.68(m，1H),7.45-7.38(m，1H),7.19-7.16(m，1H),6.89-6.87(m,1H),5.05-5.02(m,1H),4.89-4.85(m,1H),4.69-4.66(m,1H),4.40-4.34(m,3H),4.14-4.07(m,1H),3.74-3.69(m,1H),3.54-3.52(m,2H),3.49(m,1H),3.41-3.30(m,4H),2.96-2.88(m,3H),2.84-2.77(m,3H),2.68-2.66(m,1H),2.47-2.36(m,3H),2.22(s,3H),2.08-2.07(m,3H),2.04-1.98(m,3H),1.91-1.81(m,4H),1.69-1.66(m,1H),1.44(s,3H),1.32(s,3H),1.27-1.24(m,4H),1.23-1.20(m,7H),1.17-1.14(m,4H),1.08-1.06(m,3H),0.98-0.87(m,12H)；MS(ESI)m/z calcd forC48H77FN4O16[M+H]+:985.53,found:985.5,[M+2H]2+/2:493.3,found:493.6.

实施例8：中间体7的合成。

将中间体5(2.1g,2.21mmol)溶解于DMF(20mL)和水(5mL)，加入叠氮钠(1.44g,22.1mmol)。80℃搅拌48h。反应完毕后，水(20mL)和EtOAc(25mL)分液萃取。有机层，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥,过滤、减压浓缩得红棕色泡沫状固体的中间体7(1.8g,84.91％)，不经纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z calcd for C44H75N7O16[M+H]+:958.53,found:958.5,[M+2H]2+/2:479.8,found:480.1.

实施例9：B1的合成。

将中间体7(300mg,0.31mmol)溶于75％的甲醇(20mL)中，CuSO4(30mg)、抗坏血酸钠(90mg)和苯乙炔(158mg,1.55mmol)加入至上述溶液，55℃下反应24h。反应完全后，减压浓缩反应液，向反应液中二氯甲烷(20mL)，二氯甲烷萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩，柱层析(DCM/CH3OH/NH4OH＝10:1:0.1)得淡黄色固体B1(100mg,31.37％)。Mp:123–125℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.05(s,1H),7.45-7.38(m,1H),7.83-7.80(m,1H),7.43-7.40(m,2H),7.35-7.32(m,1H),5.36-5.24(m,2H),5.06-4.99(m,1H),4.91-4.86(m,1H),4.62-4.49(m,2H),4.41-4.27(m,3H),3.74-3.71(m,3H),3.56-3.54(m,1H),3.49(s,3H),3.38-3.37(m,1H),3.30-3.28(m,2H),2.88-2.72(m,7H),2.45-2.41(m,1H),2.23-2.19(m,3H),2.08-2.01(m,3H),1.90-1.89(m,2H),1.73-1.71(m,2H),1.44-1.39(m,4H),1.30-1.18(m,19H),1.08-1.07(m,3H),1.01-0.98(m,3H),0.93-0.87(m,6H).MS(ESI)m/z calcd for C50H79N7O15[M+H]+:1018.56,found:1018.5,[M+2H]2+/2:509.8,found:510.2.

实施例10：B2的合成。

与实施例9相同，将对甲基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B2(40mg,12.55％),Mp:112–114℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.02-7.99(m,1H),7.71-7.70(m,2H),7.23-7.22(m,2H),5.30(s,1H),4.91-4.87(m,2H),4.62-4.53(m,2H),4.43-4.37(m,2H),3.93-3.84(m,1H),3.74-3.72(m,1H),3.57-3.56(m,1H),3.52-3.49(m,2H),3.38(s,1H),3.32-3.28(m,2H),2.96(s,1H),2.88(s,1H),2.85-2.83(m,2H),2.44-2.41(m,2H),2.38(s,3H),2.21-2.20(m,4H),2.05-2.01(m,3H),1.92-1.90(m,2H),1.85-1.81(m,2H),1.44(s,4H),1.32-1.18(m,19H),1.07-1.06(m,4H),1.04-1.01(m,4H),0.96-0.87(m,8H)；MS(ESI)m/z calcd for C51H81N7O15[M+H]+:1032.58,found:1032.6,[M+2H]2+/2:516.8,found:517.2.

实施例11：B3的合成。

与实施例9相同，将对乙基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B3(60mg,18.82％),Mp:124–126℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.02-7.97(m,1H),7.74-7.72(m,2H),7.25-7.22(m,2H),5.30-5.22(m,2H),5.09-5.06(m,1H),4.89-4.88(m,1H),4.55-4.54(m,1H),4.41-4.38(m,4H),3.74-3.71(m,2H),3.57-3.56(m,1H),3.49(s,2H),3.37-3.35(m,1H),3.31-3.29(m,3H),2.96(s,1H),2.88-2.83(m,2H),2.70-2.66(m,2H),2.43-2.42(m,4H),2.36-2.34(m,1H),2.21(s,3H),2.06-1.98(m,3H),1.92-1.91(m,1H),1.85-1.79(m,2H),1.44(s,3H),1.31-1.19(m,20H),1.16(s,2H),1.10-1.03(m,7H),0.96-0.88(m,7H)；MS(ESI)m/z calcd for C52H83N7O15[M+2H]2+/2:523.8,found:524.2.

实施例12：B4的合成。

与实施例9相同，将对丙基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B4(30mg,9.41％),Mp:126–127℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.95(s,1H),7.74-7.72(m,2H),7.25-7.23(m,2H),5.21(s,2H),5.07(s,1H),4.91-4.88(m,1H),4.56-4.54(m,1H),4.41(s,3H),3.74-3.71(m,1H),3.58-3.57(m,1H),3.49(s,1H),3.34-3.27(m,4H),2.88-2.83(m,2H),2.63-2.60(m,2H),2.43-2.31(m,8H),2.21(s,3H),2.06-2.02(m,2H),1.92(s,1H),1.83-1.81(m,2H),1.70-1.65(m,4H),1.44(s,3H),1.30-1.17(m,19H),1.11-1.04(m,7H),0.97-0.90(m,10H).MS(ESI)m/z calcd for C53H85N7O15[M+H]+:1060.61,found:1060.7,[M+2H]2+/2:530.8,found:531.0.

实施例13：B5的合成。

与实施例9相同，将对丁基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B5(60mg,18.82％),Mp:100–103℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.95(s,1H),7.73-7.72(m,2H),7.25-7.23(m,2H),5.21(s,1H),5.07(s,1H),4.89(s,1H),4.56-4.54(m,1H),4.44-4.39(m,3H),3.57-3.56(m,1H),3.34-3.29(m,3H),2.86-2.83(m,2H),2.65-2.62(m,2H),2.43-2.42(m,7H),2.21(s,4H),2.06-1.99(m,4H),1.92(s,2H),1.85-1.81(m,3H),1.64-1.59(m,4H),1.44(s,3H),1.40-1.34(m,4H),1.30-1.17(m,18H),1.07-1.04(m,6H),0.95-0.90(m,10H).MS(ESI)m/z calcd for C54H87N7O15[M+H]+:1074.63,found:1074.5,[M+2H]2+/2:537.8,found:538.1.

实施例14：B6的合成。

与实施例9相同，将对氟苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B6(50mg,15.68％),Mp:126–128℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.02-7.89(m,1H),7.80-7.78(m,2H),7.13-7.09(m,2H),5.30-5.24(m,2H),5.09-5.06(m,1H),4.90-4.89(m,1H),4.63-4.41(m,5H),3.74-3.49(m,3H),3.35-3.29(m,3H),2.88-2.83(m,2H),2.63(s,1H),2.44-2.32(m,8H),2.23-2.21(m,4H),2.06-1.92(m,5H),1.85-1.80(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.30-1.16(m,18H),1.07-1.03(m,6H),0.92-0.88(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd forC50H78N7O15[M+H]+:1036.55,found:1036.5,[M+2H]2+/2:518.8,found:519.2.

实施例15：B7的合成。

与实施例9相同，将对氯苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B7(40mg,12.55％),Mp:126–128℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.06-8.03(m,1H),7.77-7.75(m,2H),7.43-7.38(m,2H),5.30-5.24(m,3H),5.07-5.04(m,1H),4.91-4.88(m,1H),4.55-4.37(m,5H),3.74-3.71(m,1H),3.57-3.55(m,1H),3.49(m,1H),3.37(s,1H),3.29(s,1H),2.86-2.76(m,3H),2.54(s,4H),2.44-2.38(m,2H),2.21(s,3H),2.06-1.81(m,9H),1.67-1.65(m,1H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.29-1.17(m,18H),1.07-1.00(m,6H),0.93-0.87(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C50H78ClN7O15[M+H]+:1052.52,found:1052.5,[M+2H]2+/2:526.8,found:527.1.

实施例16：B8的合成。

与实施例9相同，将间氨基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B8(40mg,12.55％),Mp:122–124℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.04-7.99(m,1H),7.12-7.09(m,3H),6.62(s,1H),5.30(s,2H),5.05-4.99(m,1H),4.89-4.88(m,1H),4.52-4.49(m,2H),4.40-4.29(m,3H),3.74-3.70(m,1H),3.66(s,1H),3.53-3.48(m,2H),3.34-3.30(m,1H),3.24(s,2H),2.96-2.83(m,3H),2.74-2.67(m,4H),2.44-2.42(m,1H),2.33-2.29(m,1H),2.21(s,4H),2.05-2.03(m,1H),1.97(m,1H),1.90-1.89(m,1H),1.84-1.82(m,1H),1.63-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.28-1.19(m,19H),1.12(s,1H),1.07-1.06(m,4H),0.98-0.87(m,12H)；MS(ESI)m/z calcd for C50H80N8O15[M+H]+:1033.57,found:1033.5,[M+2H]2+/2:517.3,found:517.7.

实施例17：B9的合成。

与实施例9相同，将3-甲氧基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B9(67mg,21.02％),Mp:119–122℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.94-7.93(m,1H),7.75-7.73(m,2H),6.96-6.94(m,2H),5.30-5.22(m,2H),5.07-5.03(m,1H),4.90-4.89(m,1H),4.62-4.33(m,6H),3.84(s,3H),3.74-3.71(m,1H),3.64(s,1H),3.57-3.56(m,1H),3.49(s,1H),3.38(s,1H),3.28(s,1H),2.88-2.79(m,4H),2.54(s,2H),2.44-2.38(m,2H),2.21(s,3H),2.05-1.98(m,3H),1.92-1.91(m,2H),1.85-1.79(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.29-1.16(m,20H),1.07-1.00(m,7H),0.92-0.90(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C51H81N7O16[M+H]+:1048.57,found:1048.8,[M+2H]2+/2:524.8,found:525.1.

实施例18：B10的合成。

与实施例9相同，将4-叔丁基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B10(83mg,26.04％),Mp:119–122℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.95(s,1H),7.76-7.75(m,2H),7.46-7.43(m,2H),5.20(s,1H),4.91-4.89(m,1H),4.56-4.54(m,1H),4.41(s,4H),3.74-3.71(m,2H),3.58-3.56(m,1H),3.49(s,2H),3.32-3.25(m,3H),2.88-2.83(m,3H),2.44-2.34(m,6H),2.21(s,3H),2.06-1.99(m,3H),1.92(s,1H),1.85-1.79(m,3H),1.62-1.61(m,2H),1.44(s,3H),1.34-1.19(m,28H),1.07-1.02(m,7H),0.93-0.90(m,6H)；MS(ESI)m/zcalcd for C54H87N7O15[M+2H]2+/2:537.8,found:538.2.

实施例19：B11的合成。

与实施例9相同，将2-甲氧基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B11(72mg,22.58％),Mp:110–113℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.31-8.23(m,2H),7.08-6.96(m,3H),5.30-5.23(m,2H),5.08-5.04(m,1H),4.90-4.88(m,1H),4.55-4.36(m,5H),4.14-3.93(m,4H),3.74-3.54(m,3H),3.37(s,1H),3.27(s,2H),2.96-2.83(m,3H),2.46-2.33(m,6H),2.20(s,3H),2.06-1.90(m,6H),1.85-1.80(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.43(s,3H),1.34-1.16(m,18H),1.09-1.00(m,7H),0.92-0.87(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C51H81N7O16[M+2H]2+/2:524.8,found:525.2.

实施例20：B12的合成。

与实施例9相同，将对溴苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B12(115mg,36.07％),Mp:112–113℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.08-8.03(m,1H),7.70-7.68(m,2H),7.57-7.53(m,2H),5.30-5.23(m,2H),5.07-5.03(m,1H),4.90-4.89(m,1H),4.62-4.33(m,5H),3.76-3.49(m,3H),3.43-3.24(m,4H),2.96-2.75(m,4H),2.53-2.42(m,5H),2.39-2.34(m,1H),2.21(s,4H),2.06-1.81(m,7H),1.68-1.59(m,2H),1.44(s,3H),1.29-1.15(m,17H),1.07-1.06(m,3H),1.01-1.00(m,3H),0.93-0.90(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd forC54H87N7O15[M+2H]2+/2:548.7,found:548.7.

实施例21：B13的合成。

与实施例9相同，将对戊基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B13(114mg,35.76％),Mp:130–132℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.97(s,1H),7.73-7.71(m,2H),7.24-7.22(m,2H),5.24-5.22(m,1H),5.08-5.04(m,1H),4.91-4.89(m,1H),4.55-4.54(m,1H),4.41-4.35(m,3H),3.63(s,1H),3.57-3.55(m,1H),3.36(s,1H),3.28(s,2H),2.86-2.83(m,2H),2.64-2.61(m,3H),2.49-2.42(m,5H),2.21(s,3H),2.06-2.02(m,2H),1.99-1.98(m,1H),1.92-1.90(m,2H),1.85-1.79(m,2H),1.66-1.61(m,4H),1.44(s,3H),1.38-1.16(m,24H),1.07-1.01(m,7H),0.92-0.88(m,10H)；MS(ESI)m/z calcd for C55H89N7O15[M+2H]2+/2:544.8,found:545.2.

实施例22：B14的合成。

与实施例9相同，将对乙氧基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B14(40mg,12.55％),Mp:122–124℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.94-7.91(m,1H),7.73-7.72(m,2H),6.95-6.93(m,2H),5.30-5.21(m,2H),5.07-5.03(m,1H),4.91-4.89(m,1H),4.62-4.34(m,5H),4.08-4.05(m,2H),3.74-3.64(m,3H),3.57-3.49(m,2H),3.38-3.28(m,3H),2.86-2.79(m,3H),2.55(s,4H),2.44-2.38(m,2H),2.21(s,3H),2.05-1.91(m,6H),1.85-1.81(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44-1.42(m,6H),1.32-1.17(m,18H),1.07-1.00(m,6H),0.92-0.87(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C52H83N7O16[M+2H]2+/2:531.8,found:532.1.

实施例23：B15的合成。

与实施例9相同，将间甲基苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B15(40mg,12.55％),Mp:118–120℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):7.99-7.98(m,1H),7.67(s,1H),7.60-7.59(m,1H),7.32-7.30(m,1H),7.17-7.14(m,1H),5.30-5.22(m,2H),5.09-5.06(m,1H),4.90-4.89(m,1H),4.56-4.54(m,1H),4.41(s,2H),3.74-3.70(m,2H),3.57-3.56(m,1H),3.49(s,2H),3.36-3.29(m,3H),2.88-2.84(m,2H),2.43-2.40(m,8H),2.21(s,4H),2.06-1.99(m,3H),1.92(s,2H),1.85-1.81(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.30-1.16(m,21H),1.07-1.03(m,7H),0.92-0.87(m,7H)；MS(ESI)m/z calcd for C51H81N7O15[M+2H]2+/2:516.8,found:517.1.

实施例24：B16的合成。

与实施例9相同，将间氯苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B16(100mg,31.37％),Mp:102–105℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.05-8.04(m,1H),7.83(s,1H),7.70-7.69(m,1H),7.43-7.32(m,2H),5.30-5.24(m,2H),5.09-5.06(m,1H),4.91-4.90(m,1H),4.63-4.41(m,5H),4.14-4.10(m,1H),3.74-3.56(m,3H),3.34-3.28(m,4H),2.96-2.83(m,3H),2.44-2.42(m,5H),2.38-2.34(m,1H),2.21(s,3H),2.06-1.92(m,6H),1.85-1.81(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.30-1.16(m,18H),1.07-1.03(m,6H),0.92-0.87(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C50H78ClN7O15[M+H]+:1074.63,found:1074.5,[M+2H]2+/2:526.8,found:527.0.

实施例25：B17的合成。

与实施例9相同，将间氟苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B17(50mg,15.68％),Mp:122–124℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.02(s,1H),7.59-7.55(m,2H),7.43-7.37(m,1H),7.08-7.02(m,1H),5.30-5.22(m,2H),5.10-5.08(m,1H),4.92-4.88(m,1H),4.63-4.41(m,5H),3.74-3.70(m,2H),3.58-3.57(m,1H),3.49(s,2H),3.33-3.16(m,4H),2.88-2.83(m,2H),2.43-2.38(m,6H),2.21(s,3H),2.06-1.93(m,5H),1.85-1.81(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.30-1.16(m,19H),1.07-1.04(m,6H),0.92-0.87(m,6H)；MS(ESI)m/zcalcd for C50H78FN7O15[M+2H]2+/2:518.8,found:519.1.

实施例26：B18的合成。

与实施例9相同，将间溴苯乙炔代替苯乙炔，获得淡黄色固体B18(80mg,25.09％),Mp:122–124℃,1H NMR(600MHz,CDCl3,δppm):8.06-7.99(m,2H),7.73-7.72(m,1H),7.45-7.43(m,1H),7.30-7.27(m,1H),5.30(s,1H),5.07-5.01(m,1H),4.91-4.89(m,1H),4.62-4.30(m,6H),3.74-3.70(m,4H),3.57-3.54(m,1H),3.49(s,4H),3.37-3.25(m,3H),2.84-2.78(m,3H),2.59(s,2H),2.45-2.38(m,2H),2.21(s,3H),2.05-2.01(m,2H),1.91(s,1H),1.84-1.79(m,2H),1.62-1.61(m,1H),1.44(s,3H),1.30(s,3H),1.26-1.16(m,16H),1.07-1.06(m,3H),1.01-1.00(m,3H),0.93-0.90(m,6H)；MS(ESI)m/z calcd for C50H78BrN7O15[M+1+2H]2+/2:549.7,found:549.8.

对制备的A1-A2、B1-B18的化合物进行抗菌活性实验。

实验原料：

在96孔板(紫外灭菌)内加入新鲜的营养肉汤培养基或含有羊血的营养肉汤培养基(3％，V/V)，将一定量待测化合物和对照药物的乙醇溶液(2560μg/mL,m/V)依次加入至96孔板A–H各行的1号孔中并采用二倍稀释法稀释，然后接种适量具有一定浊度菌液，经37℃恒温孵育24h后，观察各孔细菌生长情况，读取药物的MIC。

实验材料：

1.实验仪器与试剂：超净工作台(安徽蚌埠净化设备厂，SXK-103型)、恒温生化培养箱(上海树立仪器仪表有限公司，SHX150C型)、细菌浊度计(上海昕瑞仪器仪表有限公司，WGZ-2-XJ型)、手提式压力蒸汽灭菌器(山东新华医疗器械有限公司，YXQG02型)、接种环；营养肉汤(北京奥博星生物技术有限公司)、血平板(济南市医学科学研究所)、新鲜羊血(济南市医学科学研究所)、96孔板(Nest Biotech Co.,Ltd)、新洁尔灭(山东利尔康消毒科技股份有限公司)、无水乙醇、蒸馏水。

2.受试菌种：敏感金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC25923)、敏感伤寒沙门菌(S.typhimurium ATCC14028)、敏感枯草芽孢杆菌(B.subtilis ATCC9372)、敏感的缺陷假单胞菌(P.deficiency ATCC19146)、青霉素耐药金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC31007)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC43300)、红霉素耐药的肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae ATCC700603)。

菌种的复苏、传代、培养及保存：

取-80℃冻存的菌种，采用平板划线法接种于血平板培养基上，37℃恒温培养箱培养18–24h后，于新培养基传代，传代两次后方可取菌试验，传代的时间间隔为18–24h。

培养基、对照药物或待测化合物溶液的加入：

按表1所示方法在96孔板内加入相应的培养基、对照药物或待测化合物溶液，加样完毕后，采用微量加样器依次对96孔板A–H各行中加入的对照药物或待测化合物进行二倍递减稀释，每行均稀释至10号孔。

表1实验设计表

注：(1)受试细菌为金黄色葡萄球菌时采用营养肉汤培养基，其余受试菌种均采用含有羊血的营养肉汤培养基；

(2)若记录MIC时10号孔未见浑浊，该行中待测样品需进一步稀释以准确测定该样品的MIC。

菌液制备：

配制浊度为0.5MCF(1MCF＝3×108CFU/mL)受试细菌的生理盐水悬浮液，采用生理盐水稀释10倍(含菌量约107)，菌液应在15min内接种完毕。

接种与孵育：

采用微量加样器将菌液由96孔板各行的11号孔依次向前加至1号孔中，每孔中分别加入菌液5μl，吸头应插入液面并避免与培养基接触。接种完毕后，将96孔板于37℃恒温培养箱中放置24h。

MIC的读取：

孵育完毕后，由96孔板每行的1号孔依次向后观察，以该行各孔培养基中未出现浑浊的最后一个孔所对应的浓度为该对照药物或待测化合物的MIC，同法记录其他MIC。结果如表2所示。

表2化合物的MIC

注：

1：敏感金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC25923)

2：敏感伤寒沙门菌(S.typhimurium ATCC14028)

3：敏感枯草芽孢杆菌(B.subtilis ATCC9372)

4：敏感的缺陷假单胞菌(P.deficiency ATCC19146)

5：青霉素耐药金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC31007)

6：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(S.aureus ATCC43300)

7：红霉素耐药的肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae ATCC700603)

阿奇霉素(AZM)和克拉霉素(CAM)作为对照药物。

以上所述仅为本公开的优选实施例而已，并不用于限制本公开，对于本领域的技术人员来说，本公开可以有各种更改和变化。凡在本公开的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。

一种阿奇霉素类化合物及制备方法与应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。