专利摘要

专利摘要

本发明实施例提供了一种化合物，其结构如下式Ⅰ所示，所述化合物称为黄花远志皂苷E。本发明实施例还提供了包含所述化合物的荷包山桂花根提取物；本发明实施例还提供了一种药物组合物，包含前述化合物或荷包山桂花根提取物，以及药学上可接受的载体和/或赋形剂。本发明所提供的化合物能够抑制NO的生成，具有抗炎功效，基于此，可以预期本发明所提供的化合物或含有它的荷包山桂花根提取物或药物组合物能够用于制备治疗炎症的药物；进一步地，所述的药物可用于治疗肝炎、肺炎、肾炎、胃肠炎、泌尿系统感染、早期乳腺炎、上呼吸道感染或支气管炎。

权利要求

1.一种式Ⅰ化合物的提取方法，其特征在于，所述化合物的结构式如式Ⅰ所示：

所述化合物称为黄花远志皂苷E；所述化合物从荷包山桂花根中提取得到，且所述化合物的提取方法包括以下步骤：

S1：荷包山桂花根粉碎后，采用乙醇水溶液提取，浓缩得到提取物浸膏；

S2：将所述提取物浸膏加水混悬后，依次采用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇萃取；

S3：取S2中获得的正丁醇部位，采用硅胶柱层析后，梯度洗脱获得含有所述化合物的第一组分；

S4：对所述第一组分进行硅胶柱层析，梯度洗脱获得含有所述化合物的第二组分；

S5：对所述第二组分进行重结晶，获得所述化合物。

2.一种根据权利要求1所述提取方法获得的包含黄花远志皂苷E的荷包山桂花根提取物。

3.一种化合物在制备治疗炎症的药物中的用途，其特征在于，所述化合物的结构式如式Ⅰ所示：

所述化合物称为黄花远志皂苷E。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述炎症选自肝炎、肺炎、肾炎、胃肠炎、泌尿系统感染、早期乳腺炎、上呼吸道感染或支气管炎。

说明书

技术领域

本发明涉及新化合物技术领域，特别是涉及一种从荷包山桂花根中提取的新化合物及其在抗炎方面的应用。

背景技术

炎症在人类多种疾病的发生过程中扮演重要角色，是人类多种疾病最常见的病理过程之一，可发生于机体的任何部位和任何组织，人类的大多数疾病都与炎症过程有关。目前的抗炎药物，多采用化学合成，毒副作用大，已经严重限制了这些药物的疗效的发挥；中药及天然药物是我国的巨大财富，其具有毒副作用小等特点，所以从中药及天然药物中寻找抗炎药物是解决这些问题的有效途径。

荷包山桂花(Polygala arillata Buch.-Ham.ex D.Don)为远志科(Polygalaceae)远志属(Polygala.)植物，别称黄花远志、阳雀花，在我国有广泛的分布，民间广泛应用于治肝炎、肺炎、肾炎、胃肠炎、泌尿系统感染、早期乳腺炎、上呼吸道感染、支气管炎、风湿疼痛、疗月经不调、产后虚弱等，但对于荷包山桂花中的哪些成分具有上述作用还并不清楚。

发明内容

发明人对荷包山桂花进行了深入的研究，制备了荷包山桂花根提取物并进一步地从中提取分离出了全新的化合物；并意外地发现该化合物具有抗炎活性，可以用于制备治疗炎症的药物；并基于此完成了本发明。

本发明第一方面提供了一种化合物，其结构式如式Ⅰ所示，在本文中，将式Ⅰ所示的化合物命名为黄花远志皂苷E(arillatanoside E)。

在本发明第一方面的一些实施方式中，所述化合物从荷包山桂花根中提取得到。

本发明第二方面提供了一种前述化合物的制备方法，包括以下步骤：

S1：荷包山桂花根粉碎后，采用乙醇水溶液提取，浓缩得到提取物浸膏；

S2：将所述提取物浸膏加水混悬后，依次采用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇萃取；

S3：取S2中获得的正丁醇部位，采用硅胶柱层析后，梯度洗脱获得含有所述化合物的第一组分；

S4：对所述第一组分进行硅胶柱层析，梯度洗脱获得含有所述化合物的第二组分；

S5：对所述第二组分进行重结晶，获得所述化合物。

在本发明第二方面的一些具体实施方式中，采用乙醇水溶液提取可以为75％的乙醇水溶液冷浸提取3次，每次7天；也可以为95％乙醇回流提取2-4次，每次2-3小时。

在本发明第二方面的一些实施方式中，所述浓缩可采用减压浓缩。

在本发明第二方面的一些实施方式中，所述正丁醇部位在采用硅胶柱层析之前可进行减压浓缩。

在本发明第二方面的一些实施方式中，所述梯度洗脱为以体积100：1到1:1的氯仿-甲醇系统梯度洗脱。

在本发明第二方面的一些实施方式中，对梯度洗脱获得的各组分通过薄层层析检测，获得含有所述化合物的第一组分以及第二组分。

本发明第二方面所使用的冷浸提取、回流提取、浓缩、萃取、硅胶柱层析、梯度洗脱、薄层层析、重结晶等均为本领域常用的技术手段，为达到相应的技术效果，本领域技术人员还可采用其他的技术手段，本发明在此不做限定。

本发明第三方面提供了一种包含本发明第一方面所述化合物的荷包山桂花根提取物。

本发明第四方面提供了一种药物组合物，其中包含本发明第一方面所述的化合物或本发明第三方面所述的荷包山桂花根提取物。

在本发明第四方面的一些实施方式中，基于所述药物组合物的总重量，所述化合物的含量为1-99％；优选为20-80％；更优选为40-60％。

在本发明第四方面的一些实施方式中，所述药物组合物还包含任意药学可接受的载体和/或赋形剂。

可采用制剂领域中的常规技术，通过根据本发明的提取方法得到本发明药物组合物的原料的有效成分，与一种或更多种药学可接受的载体和/或赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本发明的药物组合物。

本发明第五方面提供了一种第一方面的化合物、第三方面的荷包山桂花根提取物或第四方面的药物组合物在制备治疗炎症的药物中的用途，所述炎症选自肝炎、肺炎、肾炎、胃肠炎、泌尿系统感染、早期乳腺炎、上呼吸道感染或支气管炎。

在本发明第五方面的一些实施方式中，所述药物给予有需要的对象的每日剂量以所述化合物计为0.01-1000mg/kg体重；优选为0.1-100mg/kg体重更优选为1-100mg/kg体重。

如本文使用的，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对已经罹患本发明所述的炎症的哺乳动物个体(优选为人)采用本发明的药物进行处理，以期对所述疾病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。

如本文所用的，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上。

本发明药物组合物中可用的“药学上可接受的载体或赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的载体，特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

如本文使用的，术语“药物组合物”具有其一般含义。此外，本发明的“药物组合物”还可以以保健品、功能性食品、食品、食品添加剂等形式存在或提供。可采用制药领域特别是制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本发明的药物组合物的原料的有效成分，任选地与一种或更多种药学可接受的载体混合，然后形成所需的剂型，来制备本发明的药物组合物。根据本发明的药物组合物，其为可以适用于口服给药、胃肠外给药或局部给药、外用给药的药物制剂。本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。具体地说，根据本发明的药物组合物，所述的药物剂型包括但不限于：片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、注射液、注射用粉剂、透皮贴剂、软膏剂、凝胶剂、栓剂、口服溶液、口服混悬液、注射用乳剂、口服乳剂等、缓释片剂、控释片剂。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

用于口服施用的剂型可包括例如片剂、丸剂、硬或软胶囊剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、散剂、粉剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂、酏剂等，并不限于此。除了活性成分外，这些制剂还可包含稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素和甘氨酸)、润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其镁盐、钙盐和聚乙二醇)。片剂还可包含粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷。必要时，其还可包含药用添加剂，例如崩解剂(如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐)、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂等。片剂可根据常用的混合、造粒或包衣的方法制备。

用于肠道外施用的剂型可包括例如注射剂、药用滴剂、软膏剂、洗剂、凝胶剂、乳膏、喷雾剂、混悬剂、乳剂、栓剂、贴剂等，并不限于此。

根据本公开的药物组合物可口服或非肠道例如经直肠、经局部、经皮肤、经静脉内、经肌内、经腹膜内或经皮下施用。

活性成分的药学可接受的剂量，即施用剂量，可以根据待治疗对象的年龄、性别和体重、待治疗的具体疾病或病理状态、疾病或病理状态的严重程度、施用途径和诊断者的判断而改变。考虑这些因素确定施用剂量在本领域技术人员的水平范围内。一般的剂量可以是0.01-1000mg/kg/日，优选为0.1-100mg/kg/日，更优选为1-100mg/kg/日。然而，本发明公开的范围不以任何方式受限于所述施用剂量。

经研究表明，本发明所提供的式Ⅰ所示的化合物能够抑制NO的生成，具有抗炎功效，基于此，可以预期本发明所提供的化合物或含有它的荷包山桂花根提取物或药物组合物能够用于制备治疗炎症的药物；进一步地，所述的药物可用于治疗肝炎、肺炎、肾炎、胃肠炎、泌尿系统感染、早期乳腺炎、上呼吸道感染或支气管炎。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1显示了黄花远志皂苷E的抗炎活性结果；

图2显示了黄花远志皂苷E的细胞毒活性研究结果。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1化合物黄花远志皂苷E的提取及表征

1、仪器与材料

X-5型显微熔点测定仪(北京泰克仪器公司)；ZF-20D暗箱式紫外分析仪(顾村电光仪器厂)；BrukerAV-III核磁共振波谱仪，TMS为内标(瑞士Bruker公司)；Synapt G2Mass质谱仪(美国Waters公司)；Agilent1260高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；SunfireTMPrep C18色谱柱(19×150mm，5μm)；Waters2489制备液相色谱仪(美国Waters公司)；柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂)；硅胶GF254薄层预制板(于成化工上海有限公司)；Sephadex LH-20(北京索莱宝科技有限公司)；所用试剂为分析纯和色谱纯。

荷包山桂花药材采自云南省，植物标本存放于天津中医药大学滨海现代中药实验室。

2、黄花远志皂苷E的提取

S1：荷包山桂花根30kg，粉碎，75％(v/v)乙醇室温冷浸提取三次，每次7天，过滤，减压浓缩得到提取物浸膏；

S2：加适量水将提取物浸膏混悬，分别依次用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇萃取三次；

S3：对正丁醇部位减压浓缩后得粗品300g，将所述粗品应用硅胶柱层析，以体积100:1、100:3、100:5、100:7、10:1、8:2、7:3、1:1的氯仿-甲醇系统梯度洗脱，每个梯度收集三个柱体积；通过薄层层析检测，收集含有黄花远志皂苷E的100:7的流分20g，即为所述第一组分；

S4：对第一组分再次应用硅胶柱层析，以体积100：1、100:3、100:7、10:1、8:2、1:1的氯仿-甲醇系统梯度洗脱，每个梯度收集三个柱体积；通过薄层层析检测，以氯仿-甲醇(4:1)为展开剂，收集含有黄花远志皂苷E的流分，即为所述第二组分；

S5：对第二组分进行重结晶，获得黄花远志皂苷E纯品8mg。

3、黄花远志皂苷E的表征

化合物黄花远志皂苷E：白色粉末(甲醇)，HR-ESI-MS(高分辨电喷雾离子质谱)给出m/z 1277.5839[M-H]-峰(Calcd for:1277.5803)，确定分子量为1278。结合1H-NMR和13C-NMR确定分子式为C60H94O29，计算不饱和度为14，10％硫酸-乙醇显紫色斑点，Liebermann-Burchard反应为阳性，Molish反应为阳性，提示其为三萜皂苷类化合物。1H-NMR(600MHz,CD3OD)给出5组糖端基氢信号：δH 5.46(1H,brs),5.44(1H,d,J＝8.4Hz),4.55(1H,d,J＝7.8Hz),4.51(1H,d,J＝7.8Hz),4.36(1H,d,J＝7.8Hz)。5个角甲基质子信号，δ:1.40(3H,s),1.28(3H,s),0.97(3H,s),0.94(3H,s),0.76(3H,s)，1个三取代烯键质子信号δ:5.67(1H,t)。13C-NMR(150MHz,CD3OD)给出60个碳信，5个糖端基碳信号δ:101.1,95.0,105.6,106.8,104.9,1个酯羰基信号δ:177.8,1个羧基信号δ:182.9,1组烯碳信号δ:128.8(C-12)和139.3(C-13)，2个连氧次甲基信号δ:70.9(C-2)和87.7(C-3)，1个连氧亚甲基信号δ:64.7(C-27)，以上数据推测化合物黄花远志皂苷E为一个齐墩果烷三萜的五糖苷，化合物黄花远志皂苷E的苷元部分与同植物鉴定的arillatanoside A的苷元presenegenin的NMR的数据基本一致(presenegenin是远志属植物中主要的皂苷元)。δ:20.8,172.8为乙酰基碳信号，酸水解经试剂衍生化后与糖标准品的衍生化产物的HPLC对照，表明化合物中存在D-葡萄糖、D-岩藻糖、L-鼠李糖以及D-木糖。HMBC谱显示：δH 1.40(H-24)和δC 87.7(C-3),53.2(C-4),181.9(C-23)相关；δH 1.28(H-25)和δC 44.6(C-1),53.2(C-4),50.1(C-9),37.5(C-10)；δH 0.76(H-26)和δC 34.3(C-7),41.7(C-8),48.6(C-14)相关；δH 0.94(H-29)和δC 46.2(C-19),31.6(C-20),34.7(C-21),24.1(C-30)相关；δH 0.97(H-30)和δC 33.0(C-22),46.2(C-19)相关，进一步验证其苷元为presenegenin。根据HMBC谱进一步推测糖的连接顺序：δH5.44(Fuc-1)和δC 177.8(C-28)相关，证明岩藻糖连在苷元28位上；δH 5.48(Rha-1)和δC72.3(Fuc-2)相关，证明鼠李糖连在岩藻糖2位上；δH 4.55(Glc-1)和δC 87.7(C-3)相关，证明葡萄糖连在苷元3位上；δH 4.51(Xyl-1,inner)和δC 85.0(Rha-4)相关，证明木糖(inner)连接在鼠李糖4位上；δH 4.36(Xyl-1,outer)和δC 85.9(Xyl-3,inner)相关，证明木糖(outer)连接在木糖(inner)的3位上；δH 5.10(Fuc-4)和δC 172.8(CH3CO-)存在相关，证明乙酰基连在岩藻糖的4位上。与已知化合物arillatanosides A比较发现，该化合物的立体化学结构并没有发生改变。1H和13C核磁共振数据见表1。从上述表征可以确定化合物黄花远志皂苷E(arillatanoside E)的化学结构式如式Ⅰ所示。

表1黄花远志皂苷E(arillatanoside E)的1H和13C核磁共振数据

1H和13C核磁数据分别在600MHz和150MHz下测得，J为耦合常数。

实施例2黄花远志皂苷E的抗炎活性测试

1、实验材料

黄花远志皂苷E采用实施例1中的提取方法制备的黄花远志皂苷E纯品；黄花远志皂苷E储备液：采用DMSO溶解黄花远志皂苷E，并用PBS缓冲液配制成1mg/ml的溶液或均匀的混合液；小鼠巨噬细胞RAW 264.7(天津中医药大学滨海实验室)；培养液：DMEM高糖培养基(美国Hyclone公司)+10％胎牛血清(美国Hyclone公司)+1％双抗(美国HyClone公司)；FlexStation 3全自动酶标仪(美国Molecular Devices公司)；Griess Reagent System试剂盒(美国Promega公司)；细菌脂多糖(LPS，美国Sigema公司，货号：L2880)。

2、实验方法

NO参与许多生理和病理过程，巨噬细胞在LPS的诱导下可以产生大量的NO，同时NO上调又可以使巨噬细胞释放炎症性细胞因子，如TNF-α、IL-1a和γ-IFN等。NO参与细胞因子尤其是对于炎症有关的细胞因子的调节，在炎症反应中具有抗炎保护作用同时也具有一定的细胞毒性。这些因子对机体既起到介导炎症的作用，又起到细胞生长分化的调节作用。巨噬细胞在细胞内、外环境变化时可通过NO产生免疫保护、免疫损伤和免疫调节作用。但NO极不稳定，很快代谢成亚硝酸根，亚硝酸根相对稳定，可被Griess Reagent检测。因此，本实验采用Griess Reagent System试剂盒检测小鼠巨噬细胞中亚硝酸盐的含量，反映细胞产生NO的水平，进而评价黄花远志皂苷E对小鼠巨噬细胞RAW 264.7内的NO生成的影响，以反映黄花远志皂苷E的抗炎活性。

具体实验方法为：

1)取对数生长期的细胞，用细胞刮轻轻刮下，均匀的接种于24孔培养板中，每孔接种细胞5×105个，加入500μL培养液，37℃，5％CO2培养箱中培养2小时；

2)将细胞分为黄花远志皂苷E组，阳性对照组(Dex组)，对照组(control)和LPS组；待细胞贴壁后，吸出孔中的培养液；然后黄花远志皂苷E组加入含有不同终浓度的黄花远志皂苷E的培养液(黄花远志皂苷E终浓度分别为50μg/mL、25μg/mL和12.5μg/mL)；Dex组加入含有地塞米松磷酸钠(终浓度5μg/mL)的培养液；对照组和LPS组采用正常培养液；

3)继续培养1小时后，除对照组外，其他组每孔加入终浓度为100ng/mL LPS对细胞刺激16小时；吸取上清液于1.5mL离心管中，1000转/min离心10min，吸取上清液于96孔培养板中，每孔50μL，平行3个复孔；吸取50μL Griess Reagent System试剂盒中的Sulfanilamide Solution反应液于每孔中(避光操作)，孵育5-10分钟；吸取50μL试剂盒中的NED反应液于每孔中(避光操作)，孵育5-10分钟；30分钟内进行OD值检测，检测波长为548nm；

4)按照Griess Reagent System试剂盒使用说明书依次稀释亚硝酸钠标准品，以超纯水(电阻率大于18.2MΩ·cm)稀释成所需浓度，实验共设有8个浓度(100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.13μM、1.56μM、超纯水)，每个浓度设置3个副孔，每孔50μL；吸取50μLSulfanilamide Solution反应液于每孔中(避光操作)，孵育5-10分钟；吸取50μL NED反应液于每孔中(避光操作)，孵育5-10分钟；30分钟内进行OD值检测，检测波长为548nm。得到标准曲线：y＝0.0072x+0.0557(R2＝0.9995).

5)将OD值带入标准曲线，计算出亚硝酸盐的含量。

3、实验结果

图1中以柱状图形式显示了小鼠巨噬细胞RAW 264.7在12.5、25、50μg/mL黄花远志皂苷E的处理下产生亚硝酸盐的量，进而反映了小鼠巨噬细胞RAW 264.7内产生NO的水平。结果显示LPS可刺激RAW 264.7产生NO，黄花远志皂苷E能显著抑制NO的生成，且抑制效果随黄花远志皂苷E的浓度增加而增强，说明黄花远志皂苷E具有显著的抗炎活性。*P<0.05，n＝3；**P<0.01，n＝3，与LPS组比较。

实施例3黄花远志皂苷E的细胞毒活性测试

1、实验材料

Cell Counting Kit-8试剂盒(日本Dojindo公司)。

2、实验方法

1)取对数生长期的细胞用细胞刮轻轻刮下，均匀的接种在96孔板中(边缘不接种细胞，以无菌PBS填充)，每孔100μL，接种细胞数约1×104个/孔37℃、5％CO2培养箱中培养2小时；

2)将细胞分为黄花远志皂苷E组，DXM组，对照组(control)和LPS组；待细胞贴壁后，吸出孔中的培养液；然后黄花远志皂苷E组加入含有不同终浓度的黄花远志皂苷E的培养液(黄花远志皂苷E终浓度分别为50μg/mL、25μg/mL和12.5μg/mL)；DXM组加入含有地塞米松磷酸钠(终浓度5μg/mL)的培养液；对照组和LPS组采用正常培养液；培养1小时后，除对照组外，其他每孔加入LPS(终浓度100ng/mL)对细胞刺激16小时；向每孔加入10μL CCK-8溶液(Cell Counting Kit-8试剂盒中的溶液，避光操作，避免气泡生成)，培养1-4h后，在酶标仪下测450nm下的OD值。细胞存活率实验采用CellCounting Kit-8试剂盒，采用该试剂盒的标准操作程序进行。

3、实验结果

结果如图2所示，黄花远志皂苷E在不同浓度下，均不影响小鼠巨噬细胞RAW 264.7的存活率，说明黄花远志皂苷E不具有细胞毒活性。

实施例4：制备本发明药物组合物的片剂

根据常用方法混合以上成分并制成片剂。

实施例5：制备本发明药物组合物的胶囊

根据常用方法混合以上成分并装入明胶胶囊中。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

本说明书中的各个实施例均采用相关的方式描述，各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其，对于系统实施例而言，由于其基本相似于方法实施例，所以描述的比较简单，相关之处参见方法实施例的部分说明即可。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

黄花远志皂苷E、包含其的提取物及应用专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。