专利摘要

专利摘要

一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，它涉及一种土壤中磷脂脂肪酸的固液分离装置，尤其是适用于高有机质含量的土壤中微生物细胞中磷脂脂肪酸的提取分离，本实用新型是为了解决现有固液相分离不完全、杂质高、误差大、测定精度低的问题的技术问题。一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置由带盖玻璃试管、长嘴胶头吸管、长嘴胶头吸管的胶头和试管架组成，所述长嘴胶头吸管尾端与长嘴胶头吸管的胶头连接，长嘴胶头吸管的前端为细长嘴。采用本实用新型的装置与采用常规提取方法相比检测效率提高8‑12％，检出率提高7‑10％。本实用新型属于土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液分离技术领域。

权利要求

1.一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置由带盖玻璃试管(1)、长嘴胶头吸管(2)、长嘴胶头吸管的胶头(3)和试管架(4)组成，所述长嘴胶头吸管(2)尾端与长嘴胶头吸管的胶头(3)连接，长嘴胶头吸管(2)的前端为细长嘴。

2.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于所述带盖玻璃试管(1)长度为12cm，容积为80ml。

3.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于所述带盖玻璃试管(1)为磨砂口，且带玻璃盖(5)。

4.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于所述长嘴胶头吸管(2)长度为15cm。

5.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于所述试管架(4)为铝合金试管架。

6.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置，其特征在于所述试管架(4)为12或24孔。

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种土壤中磷脂脂肪酸的固液分离装置，尤其是适用于高有机质含量的土壤中微生物细胞中磷脂脂肪酸的提取分离。

背景技术

磷脂脂肪酸(phospholipid fatty acids,PLFA)是微生物细胞膜的主要组成成分。它只存在于活体微生物细胞中，当微生物死亡后，磷脂会随着细胞膜的降解而消失。该指标能指示不同微生物群落，如细菌、真菌、放线菌和原核生物的群落数量和结构，可用于分析活体微生物群落结构特征，目前已被广泛应用于特定条件下土壤生态系统中微生物群落结构的分析。且随着现代分析技术的发展，该指标可以结合13C同位素失踪技术(13C-PLFA)，通过质谱分析特定微生物的细胞膜中来源于外源添加有机物质的13C丰度和量，定量化研究不同类群的微生物对有机物质的分解利用能力，进而评价不同类群微生物的功能和属性。

目前，中国专利已有关于土壤磷脂脂肪酸提取装置或提取方法的阐述，但是都没有对土壤磷脂脂肪酸提取中土壤相和有机相的分离方法进行详细阐述。提取时土壤磷脂脂肪酸是否被全部提取进入有机相，有机相与固体相是否完全分离，会直接影响后续测定数据的准确性和精度，也影响对不同类群微生物群落结构和功能的准确判读。特别地，对于高有机质含量的黑土，其内常常含有大量腐殖化程度较高但未完全变为土壤有机质的植物残体，这部分高分子的化合物密度较低，如果前处理不当，经过氯仿-甲醇相提取液提取，来源于植物的磷脂会进入到有机相中，剩余的植物残体往往会漂浮在固相和有机相界面处，对后续的固液相分离也造成一定的干扰，使土壤磷脂脂肪酸的提取不彻底。

实用新型内容

本实用新型的目的是为了解决现有固液相分离不完全、杂质高、误差大、测定精度低的问题的技术问题，提供了一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置。

一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置由带盖玻璃试管、长嘴胶头吸管、长嘴胶头吸管的胶头和试管架组成，所述长嘴胶头吸管尾端与长嘴胶头吸管的胶头连接，长嘴胶头吸管的前端为细长嘴。

所述带盖玻璃试管长度为12cm，容积为80ml。

所述带盖玻璃试管为磨砂口，且带玻璃盖。

所述长嘴胶头吸管长度为15cm。

所述试管架为铝合金试管架。

所述试管架为12或24孔。

本实用新型对提取装置进行改进，提高了土壤磷脂脂肪酸的提取分离程度，最终找到了利于提高有机质含量黑土磷脂脂肪酸充分分离的方法。

附图说明

图1是本实用新型的结构示意图。

具体实施方式

本实用新型技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式中一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置由带盖玻璃试管1、长嘴胶头吸管2、长嘴胶头吸管的胶头3和试管架4组成，所述长嘴胶头吸管2尾端与长嘴胶头吸管的胶头3连接，长嘴胶头吸管2的前端为细长嘴。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是所述带盖玻璃试管1长度为12cm，容积为80ml。其他与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是所述带盖玻璃试管1为磨砂口，且带玻璃盖5。其他与具体实施方式一或二相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是所述长嘴胶头吸管2长度为15cm。其他与具体实施方式一至三之一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是所述试管架4为铝合金试管架。其他与具体实施方式一至四之一相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是所述试管架4为12或24孔。其他与具体实施方式一至五之一相同。

采用下述实验验证本实用新型效果：

实验一：

结合图1一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离方法按照以下步骤进行：

一、配制Blight-Dyer提取液：

将氯仿、甲醇和柠檬酸按照1:2:0.8的体积比混合，即得Blight-Dyer提取液；

二、将3g冷冻干燥土样加入到带盖玻璃试管1中，加入1.5ml柠檬酸钠缓冲液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2ml Blight-Dyer提取液，盖上玻璃盖5，得混合液，所述柠檬酸钠缓冲液浓度为0.15mol/L，pH值为4；

三、将步骤二的混合液涡旋2min，静止2h，以3000rpm离心10min，用长嘴胶头吸管2吸取上清液转移到另一个带盖玻璃试管1中，沉淀；

四、向沉淀后的滤渣内，加入1.5ml柠檬酸钠缓冲液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2mlBlight-Dyer提取液，盖上玻璃盖5，得混合液，所述柠檬酸钠缓冲液浓度为0.15mol/L，pH值为4；

混合液涡旋2min，静止2h，以3000rpm离心10min，用长嘴胶头吸管2吸取上清液转移到另一个带盖玻璃试管1中，沉淀；

五、重复步骤四2次，收集所有上清液并合并(在最后一次吸液时，在保证不吸取土样浑浊液条件下，尽可能慢慢将全部上清液吸出，并转移到合并的上清液，备用。)，即完成土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离。

采用本实验的一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置进行土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离与采用常规提取方法相比检测效率提高8-12％，检出率提高7-10％。

一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离装置专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。