专利摘要

本发明涉及无溶剂法制备20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇的方法。实验结果表明，本发明提供的方法具备成本低、操作简单、产率高、同时得到两种不同皂苷元等特点，为大量生产抗癌活性的20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇提供方法基础。

权利要求

1.一种制备原人参二醇和原人参三醇的方法，其特征是以含人参总皂苷或三七总皂苷的提取物为原料，在无溶剂的条件下，进行碱解反应，经柱层析纯化得到原人参二醇和原人参三醇。用碱金属氢氧化物进行碱解反应，碱用量与皂苷的比值范围为1～2，碱解温度为80～200℃，反应时间为2～6小时。

2.如权利要求书1所述的制备方法，其特征在于所述碱解反应中的碱为氢氧化钠或者氢氧化钾。

3.如权利要求书1所述的制备方法，其特征在于所述柱层析纯化所用的淋洗液为氯仿和甲醇的混合物。

说明书

技术领域

本发明涉及一种原人参二醇和原人参三醇的制备方法。具体是以三七总皂苷或人参总皂苷为原料，采用无溶剂法进行碱解，经柱层析纯化得到原人参二醇和原人参三醇。

背景技术

三七和人参同属五加科植物，是我国传统的珍贵药材。

三七(Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen)干燥的根入药。别名山膝、金不换、田膝、田七、参三七、血参、人参三七、滇三七。三七用于治疗疾病已有悠久的历史，在本草纲目以前的《医门密旨》、《跌损妙方》已有记载，因此三七是我国的传统珍贵药材。

人参(panax ginsen C.A)是常见的补益中药，其主要成分是人参皂苷.人参首见于<神农本草经>.被列为上品，称其″主补五脏，安精神，安魂魄，止惊悸，除邪气，明目开心益智，久服轻身延年″.补气之能冠群草.方用之胜百药，其大补元气为人们所公认.故凡诸虚百损，气血阴阳，直接间接皆可补之.对元气大虚，脾肺之气不足，建伤血亏，神衰诸症疗效更为显著.实为温补，滋补，急补，缓补之佳品.

三七和人参有效成分为三七皂苷和人参皂苷。他们具有改善心肌缺血、降血脂、降血压、抗血栓、抗休克、抗纤维化活性、抗炎、镇痛、镇静、降血糖、抗衰老、增强免疫力和保肝利胆、抗癌等作用。迄今为止，已从三七皂苷和人参皂苷的不同部分共分离得到100余种单体皂苷成分，这些单体皂苷成分大多数为达玛烷型的20(S)-原人参二醇型「20(S)-protopanaxdiol」和20(S)-原人参三醇型「20(S)-peotopanaxatriol」。

研究表明原人参二醇、原人参三醇具有多种生理功效，且为进一步三七皂苷和人参皂苷有效部位，首先需获得原人参二醇、原人参三醇，并对其进行结构改造，合成系列衍生物，寻找活性中心。

如何水解三七皂苷和人参皂苷获得原人参二醇、原人参三醇是非常必要，目前现有的水解方法有：1)酸水解，通过直接酸水解所得到的产物是侧链环化的人参二醇，而非原人参二醇；另有专利(专利号CN 1193037C)报道将人参皂苷在含有保护剂的有机溶剂酸性水溶液中惰性气体保护下进行，水解温度为30～80℃，时间为2小时～10天，得到原人参二醇，该方法解决了人参皂苷在酸解条件下不稳定，易破环的问题，但是该方法所用的原料的人参皂苷的纯度必须≥90％，反应时间长，反应条件苛刻。当使用不同的酸时，浓度和水解温度不同，造成反应条件难以控制。2)碱催化降解的方法有：专利1(中国专利CN1252082C)将人参皂苷的提取物溶于有机溶剂中，加入醇钠进行碱解，碱解温度为80～100℃，反应时间为24～90小时，反应的特点是在反应的过程中要不断通入氧气或压缩空气，通过柱层析纯化得到20(S)-原人参二醇及原人参三醇。该方法解决了人参皂苷不稳定，容易环化的问题，但此方法中使用了强碱醇钠，提高了反应的成本并且在反应中要不断通入氧，加大了反应的操作难度，且反应时间长；专利2(中国专利CN 100584855C)将人参皂苷采用氧和过氧化物协同氧化碱解制备20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇；专利3(中国专利CN 1249075C)利用催化热解，选择性脱水、酸解、碱解等单元操作，针对不同的原料采用不同的路线制备原人参二醇和原人参三醇。上述方法中存在操作步骤繁琐，或者产率低，副产物多，或者要使用大量的钠，不适于工业生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单的，适合于工业生产的制备原人参二醇和原人参三醇的方法。该方法具有反应条件温和、反应时间短、产率高、反应过程不需要溶剂、环保等优点。

本发明中的原料为人参属植物提取物、绞股蓝属植物提取物为原料，在不需要溶剂的条件下进行碱解反应，经柱层析分离纯化，同时得到原人参二醇和原人参三醇。

本发明克服了酸性条件下降解常会使侧链环合或发生20位碳构型的改变，高温高压碱水溶液降解法及酶解法的反应过程复杂、产率低的缺点，具有反应条件温和，反应时间短、反应过程不需要溶剂，产率高等优点，故本发明适于大规模生产。

具体实施例

取三七总皂苷100g，150g NaOH，将二者充分研磨，混合均匀后，用反应釜加热至100-200℃，反应2-10h，冷却至室温，加入2000mL水，溶解，用乙酸乙酯萃取(50mL×5)。合并有机相，旋干得粗产品。将粗产品进行硅胶柱层析分离。「洗脱剂V(氯仿)∶V(甲醇)＝50∶1」，分离得到20(S)-原人参二醇，产率为10％，「洗脱剂V(氯仿)∶V(甲醇)＝20∶1」分离得到20(S)-原人参三醇产率为18％。

20(S)-原人参二醇的表征

IR 3282.9，2966.0，1452.6，1377.1，1120.5，1030.1；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.17(t，J＝6.8Hz，1H)，3.60(td，J＝10.3，5.9Hz，1H)，3.2(dd，J＝11.3，5.0Hz，1H)，1.70(S，3H)，1.64(S，3H)，1.20(S，3H)，0.99(S，3H)，0.98(S，3H)，0.89(S，3H)，0.88(S，3H)，0.78(S，3H)；¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)δ131.96，124.89，78.89，74.69，71.00，55.89，53.42，51.64，50.09，47.86，39.78，38.99，38.95，37.15，34.81，34.41，31.20，31.00，28.04，27.42，27.05，26.51，25.76，22.38，18.30，17.77，16.87，16.10，15.73，15.38

20(S)-原人参三醇的表征

IR 3346.5，2963.4，1711.6，1453.6，1376.5，1029.8，755.4；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ5.17(t，J＝6.8Hz，1H)，4.11(td，J＝10.3，4.2Hz，1H)3.61(td，J＝10.5，5.2Hz，1H)，3.18(dd，J＝11.5，4.9Hz，1H)，1.70(S，3H)，1.64(S，3H)，1.32(S，3H)，1.22(S，3H)，1.07(S，3H)，0.99(S，3H)，0.94(S，3H)，0.92(S，3H)；¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)132.12，124.71，78.57，74.81，70.75，68.67，61.13，53.33，51.40，49.50，47.55，47.00，40.97，39.26，39.10，38.77，34.24，30.96，30.86，27.14，27.00，26.43，25.72，22.34，17.74，17.24，17.14；ESI其(2M+H)⁺峰质量为954.3.

应用无溶剂法制备原人参二醇和原人参三醇专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。