专利摘要

专利摘要

本发明涉及药物化学技术领域，且公开了一种用于改善微循环障碍的新化合物，新化合物化学通式为：该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物分别处理斑马鱼，相比于正常组和对照组，在不同浓度下，新化合物分别处理的斑马鱼对普纳替尼诱导血栓模型斑马鱼的血流动力学具有明显的改善作用，对花生四烯酸诱导的斑马鱼血栓形成具有显著的预防作用，对普纳替尼诱发的斑马鱼血管内皮损伤均具有良好的保护作用，对LPS诱导的斑马鱼炎症均具有显著的抗炎作用，能明显抑制炎症斑马鱼凝血因子V(f5)的表达，并且新化合物有良好的抗氧化作用，对微循环障碍具有明显的改善和优异的治疗效果。

权利要求

1.一种用于改善微循环障碍的化合物，其特征在于：所述化合物化学通式为：化合物为下列化合物之一：

2.一种权利要求1所述的用于改善微循环障碍的化合物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

(1)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再缓慢滴加丁二酸酐类化合物，在氮气氛围中，20-40℃下匀速搅拌反应3-8h；

(2)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物，化学通式为其中R基团以下任意一种，H原子、-COOCH3、-CH2CH＝CH(CH2)5CH3、-(CH2)9CH3、-CH2CH＝CH(CH2)6CH3、-CH2CH＝CH(CH2)8CH3，化学反应方程式为：

(3)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱酯化产物，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再加入20(S)-原人参二醇，将溶液在20-40℃下匀速搅拌反应10-15h；

(4)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:0.5-1.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到化合物，化学反应方程式为：

3.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于：所述超干二氯甲烷溶剂质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm。

4.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于：所述丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐。

5.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的东莨菪碱、丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.5-5:2.5-3.5:1-1.3。

6.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的东莨菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1-1.2:1-1.3:3.5-4.5。

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，具体为一种用于改善微循环障碍的新化合物及其制法。

背景技术

微循环是微静脉和微动脉之间毛细血管中的血液循环，它包括毛细淋巴管、微动脉、微静脉和组织管道内的体液循环，微循环障碍是血液理化性质的改变，使管腔狭窄，血液流速或减慢或血栓形成，导致局部组织缺血缺氧甚至坏死，引起一系列临床症状，人体衰老、高血压、心脑血管等多种疾病主要是微循环障碍所致，现今的生活方式、饮食、压力、污染等都是造成微循环障碍的主要外部原因，微循环发生障碍会使很多人处于亚健康状态，严重时会导致心梗或中风等其他重大疾病。

目前，针对微循环障碍临床主要采用药物治疗和非药物治疗方法，药物主要有：华法、林肝素等抗凝血药；2,5-二羟基苯磺酸钙、递法明等微循环血管保护药；如马来酸桂哌齐特、己酮可可碱等血管扩张药；如阿司匹林、潘生丁等抗血小板药；血栓通、复方丹参滴丸等中药制剂，大多数药物只能治疗特定部位如心脏、脑部等器官的微循环障碍形成的症状，只有针对整个人体微循环系统都有效的药物，才是治疗和预防微循环障碍的优先选择。

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于改善微循环障碍的新化合物及其制法，该化合物对于微循环障碍具有明显的改善和优异的治疗效果。

(二)技术方案

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于改善微循环障碍的新化合物：所述新化合物化学通式为： 其中R基团以下任意一种，H原子、-COOCH3、-CH2CH＝CH(CH2)5CH3、-(CH2)9CH3、-CH2CH＝CH(CH2)6CH3、-CH2CH＝CH(CH2)8CH3，新化合物为下列化合物之一：

优选的，所述新化合物制备方法包括以下步骤：

(1)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再缓慢滴加丁二酸酐类化合物，在氮气氛围中，20-40℃下匀速搅拌反应3-8h。

(2)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物，化学通式为 其中R基团以下任意一种，H原子、-COOCH3、-CH2CH＝CH(CH2)5CH3、-(CH2)9CH3、-CH2CH＝CH(CH2)6CH3、-CH2CH＝CH(CH2)8CH3，化学反应方程式为：

(3)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱酯化产物，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再加入20(S)-原人参二醇，将溶液在20-40℃下匀速搅拌反应10-15h。

(4)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:0.5-1.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物，化学反应方程式为：

优选的，所述超干二氯甲烷溶剂质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm。

优选的，所述丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐。

优选的，所述步骤(1)中的东莨菪碱、丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.5-5:2.5-3.5:1-1.3。

优选的，所述步骤(3)中的东莨菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1-1.2:1-1.3:3.5-4.5。

(三)有益的技术效果

与现有技术相比，本发明具备以下有益的技术效果：

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物分别处理斑马鱼，相比于正常组和阿司匹林处理的对照组，在不同浓度下，新化合物分别处理的斑马鱼对普纳替尼诱导血栓模型斑马鱼的血流动力学具有明显的改善作用，

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和阿司匹林处理组，新化合物对花生四烯酸诱导的斑马鱼血栓形成具有显著的预防作用。

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和阿司匹林处理组，新化合物对普纳替尼诱发的斑马鱼血管内皮损伤均具有良好的保护作用。

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和吲哚美辛处理组，新化合物对LPS诱导的斑马鱼炎症均具有显著的抗炎作用。

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和吲哚美辛处理组，新化合物能明显抑制炎症斑马鱼凝血因子V(f5)的表达。

该一种用于改善微循环障碍的新化合物，通过不同浓度的新化合物处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和谷胱甘肽处理组，新化合物有良好的抗氧化作用，并且对微循环障碍具有明显的改善和优异的治疗效果。

具体实施方式

为实现上述目的，本发明提供如下具体实施方式和实施例：一种用于改善微循环障碍的新化合物：所述新化合物化学通式为： 其中R基团以下任意一种，H原子、-COOCH3、-CH2CH＝CH(CH2)5CH3、-(CH2)9CH3、-CH2CH＝CH(CH2)6CH3、-CH2CH＝CH(CH2)8CH3，新化合物为下列化合物之一：

新化合物制备方法包括以下步骤：

(1)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再缓慢滴加丁二酸酐类化合物，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐；丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.5-5:2.5-3.5:1-1.3，反应在氮气氛围中，20-40℃下匀速搅拌反应3-8h。

(2)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物，化学通式为 其中R基团以下任意一种，H原子、-COOCH3、-CH2CH＝CH(CH2)5CH3、-(CH2)9CH3、-CH2CH＝CH(CH2)6CH3、-CH2CH＝CH(CH2)8CH3，化学反应方程式为：

(3)向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20-40min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1-1.2:1-1.3:3.5-4.5，将溶液在20-40℃下匀速搅拌反应10-15h。

(4)通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2-4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:0.5-1.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物，化学反应方程式为：

实施例1

(1)制备东莨菪碱酯化产物1：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌30min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.8:3:1.2，反应在氮气氛围中，30℃下匀速搅拌反应6h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物1。

(2)制备新化合物1：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物1，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌25min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1.1:1.3:4.2，将溶液在40℃下匀速搅拌反应12h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程3次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物1。

实施例2

(1)制备东莨菪碱酯化产物2：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌40min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:4.5:3:1.3，反应在氮气氛围中，30℃下匀速搅拌反应6h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程3次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物2。

(2)制备新化合物2：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物2，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌25min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1:1.2:4.2，将溶液在30℃下匀速搅拌反应12h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物2。

实施例3

(1)制备东莨菪碱酯化产物3：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌40min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.2:2.5:1.1，反应在氮气氛围中，35℃下匀速搅拌反应7h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程3次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物3。

(2)制备新化合物3：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物3，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌30min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1:1.2:3.6，将溶液在25℃下匀速搅拌反应10h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程3次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物3。

实施例4

(1)制备东莨菪碱酯化产物4：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.5:3.2:1.1，反应在氮气氛围中，40℃下匀速搅拌反应3h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物4。

(2)制备新化合物4：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物4，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌20min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1.1:1.2:4，将溶液在35℃下匀速搅拌反应15h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:0.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物4。

实施例5

(1)制备东莨菪碱酯化产物5：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌20min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:4:3.2:1，反应在氮气氛围中，30℃下匀速搅拌反应8h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程2次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物5。

(2)制备新化合物5：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物5，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌30min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1.1:1:3.8，将溶液在35℃下匀速搅拌反应15h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程3次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物5。

实施例6

(1)制备东莨菪碱酯化产物6：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入超干二氯甲烷溶剂、东莨菪碱、催化剂三乙胺(TEA)和添加剂脱氧腺苷一磷酸(DMAP)，匀速搅拌40min，再缓慢滴丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物为以下化合物任意一种：丁二酸酐、(R)-(+)-2-乙酰氧基丁二酸酐、N-癸基丁二酸酐、N-癸烯基丁二酸酐、壬烯基丁二酸酐、十二烯基丁二酸酐，其中丁二酸酐类化合物、三乙胺和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:3.6:2.8:1.3，反应在氮气氛围中，40℃下匀速搅拌反应8h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，使用无水乙醚洗涤固体产物，并干燥，将固体产物通过重结晶纯化过程，制备得到东莨菪碱酯化产物6。

(2)制备新化合物6：向反应瓶中通入氮气排出空气，加入质量分数≥99.5％，含水量≤50ppm的超干二氯甲烷溶剂，东莨菪碱酯化产物6，混合均匀后加入活化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和添加剂脱氧腺苷一磷酸，匀速搅拌40min，再加入20(S)-原人参二醇，其中菪碱酯化产物、20(S)-原人参二醇、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和脱氧腺苷一磷酸的物质的量比为1:1.2:1.2:4.3，将溶液在20℃下匀速搅拌反应12h，通过TLC薄层色谱分析法观测反应进程，当东莨菪碱酯化产物反应完全后，向溶液中加入二氯甲烷和饱和食盐水，进行萃取过程4次，向二氯甲烷有机相中加入无水硫酸钠进行除水过程，将溶液过滤取得滤液，减压浓缩除去溶剂，然后将浓缩混合物通过硅胶层析柱进行薄层色谱分离，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1.5，将分离得到的含有产品的洗脱剂富集，通过减压浓缩和真空抽滤除去洗脱剂，制备得到新化合物6。

新化合物1、2、5对斑马鱼的血流动力学改善作用实验：

随机选取360尾受精后5天转基因血管荧光斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，用普纳替尼诱导斑马鱼建立血栓模型，水溶给予新化合物1、2、5(浓度分别为0.22、0.65和1.95μg/mL)，阳性对照药阿司匹林45μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL，各实验组与普纳替尼共同处理18h后，用邻联茴香胺进行染色，染色后每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于心跳血流分析系统下录制斑马鱼血流视频，分析统计斑马鱼心输出量(O)和血流速度(V)，评价心输出量增加作用和血流速度增加作用，以心输出量和血流速度的统计学意义分别评价三种供试品对普纳替尼诱导血栓模型斑马鱼血流动力学的改善作用。

结论：通过不同浓度的新化合物1、2、5分别处理斑马鱼，相比于正常组和阿司匹林处理的对照组，新化合物1、2、5分别处理的斑马鱼对普纳替尼诱导血栓模型斑马鱼的血流动力学具有明显的改善作用。

新化合物1、3、6对花生四烯酸诱导的血小板聚集性血栓形成的防治作用实验：

随机选取360尾受精后3天黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，水溶给予新化合物1、3、6(浓度为低剂量1.74、中剂量5.21和高剂量15.63μg/mL)，阳性对照药阿司匹林25μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。各组分别处理3h后，除正常对照组外，其余实验组均水溶给予花生四烯酸诱导斑马鱼建立血栓模型。处理结束后，用邻联茴香胺进行染色，染色后每个实验组随机选取10尾斑马鱼在解剖显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析并采集数据，统计斑马鱼心脏红细胞染色强度，以心脏红细胞染色强度的统计学分析结果分别评价三种供试品对花生四烯酸诱导的血小板聚集性血栓形成的预防作用。

结论：通过不同浓度的新化合物1、3、6处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和阿司匹林处理组，在本实验浓度条件下，新化合物1、3、6对花生四烯酸诱导的斑马鱼血栓形成具有显著的预防作用。

新化合物1、4、5对血管内皮的保护作用实验：

随机选取360尾受精后5天转基因血管荧光斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，用普纳替尼诱导斑马鱼建立血栓模型，水溶给予新化合物1、4、5(浓度分别为低剂量0.22、中剂量0.65和高剂量1.95μg/mL)，阳性对照药阿司匹林45μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL，各实验组与普纳替尼共同处理18h后，随机选取10尾斑马鱼在荧光显微镜下拍照并采集数据，拍照部位统一选取泄殖孔上方对应的节间血管，利用尼康NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析，计算斑马鱼节间血管直径(D)。以节间血管直径的统计学意义评价三个供试品对普纳替尼诱发的斑马鱼血管内皮损伤的保护作用。

结论：通过不同浓度的新化合物1、4、5处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和阿司匹林处理组，在本实验浓度条件下，新化合物1、4、5对普纳替尼诱发的斑马鱼血管内皮损伤均具有良好的保护作用。

新化合物1、3、5抗炎作用实验：

随机选取360尾受精后3天转基因中性粒细胞荧光斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。水溶新化合物1、3、5(浓度均分别为低剂量3.47、中剂量10.42和高剂量31.25μg/mL)，阳性对照药吲哚美辛28.62μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。各组分别处理1h后，除正常对照组外，其余实验组均卵黄囊注射给予LPS诱导斑马鱼建立细菌性炎症模型，各浓度组与LPS共同处理2h后，每组随机选取10尾斑马鱼在荧光显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析并采集数据，统计斑马鱼卵黄囊炎症部位中性粒细胞个数，以卵黄囊炎症部位中性粒细胞个数的统计学分析结果分别评价三种供试品的抗炎作用。

结论：通过不同浓度的新化合物1、3、5处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和吲哚美辛处理组，在本实验浓度条件下，新化合物1、3、5对LPS诱导的斑马鱼炎症均具有显著的抗炎作用。

新化合物1、3、4对相关基因的影响作用实验：

随机选取360尾受精后3天转基因中性粒细胞荧光斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。水溶给予新化合物1、3、4(浓度分别为低剂量3.47、中剂量10.42和高剂量31.25μg/mL)，阳性对照药吲哚美辛28.62μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。各组分别处理1h后，除正常对照组外，其余实验组均卵黄囊注射给予LPS诱导斑马鱼建立细菌性炎症模型，各浓度组与LPS共同处理2h后收集样本，使用经典Trizol法提取各实验组斑马鱼总RNA后，利用Thermo超微量分光光度计对总RNA浓度和纯度进行测定，取2μg斑马鱼样品总RNA，按照cDNA第一链合成试剂盒说明操作，合成20μL cDNA置于-20℃保存，用β-actin作为基因表达的内参，计算凝血因子V(f5)和凝血因子X(f10)的RNA相对表达量。

结论：通过不同浓度的新化合物1、3、4处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和吲哚美辛处理组，在本实验浓度条件下，新化合物1、3、4能明显抑制炎症斑马鱼凝血因子V(f5)的表达。

新化合物1、2、6的抗氧化作用实验：

随机选取110尾受精后3天野生型AB品系斑马鱼于12孔板中，每孔(实验组)均处理10尾斑马鱼。水溶给予新化合物(浓度分别为低剂量0.43、中计量1.3和高剂量3.91μg/mL)，阳性对照药谷胱甘肽30.7μg/mL浓度，同时设置正常对照组(E3处理斑马鱼)，每孔容量为1mL。各浓度组分别加入活性氧(ROS)检测试剂，然后将斑马鱼转移至96孔酶标板中，每孔1尾，每孔容量为100μL，置于28℃培养箱中培养。处理1天后，应用多功能酶标仪对各实验组斑马鱼进行ROS荧光分析，以荧光值的统计学意义评价三个供试品抗氧化作用。

结论：通过不同浓度的新化合物1、2、6处理斑马鱼，相对于正常组、模型组和谷胱甘肽处理组，在本实验浓度条件下，新化合物1、2、6有良好的抗氧化作用。

一种用于改善微循环障碍的新化合物及其制法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。