专利摘要

本发明公开了一种超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒及其制备方法，以六水合硝酸锌和2‑甲基咪唑为原料，引入稀土配合物为荧光分子合成了沸石咪唑酯骨架材料‑8包覆稀土配合物的核心荧光颗粒；在乙醇和水混合溶剂中以六水合硝酸锌和咪唑‑2‑甲醛为原料，在核心荧光颗粒表面原位生长疏水性的沸石咪唑酯骨架材料‑90壳层；最后对具有核壳结构的复合荧光颗粒表面进行氟化修饰，获得能够保持荧光稳定的超疏水壳层保护的复合荧光颗粒。该复合荧光颗粒具有良好的分散性和荧光稳定性，平均粒径为60±5nm，荧光寿命可达1.8ms，量子产率可达19.1％，在生物检测、荧光成像等领域有巨大的应用前景。

权利要求

1.一种超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒，其特征在于，所述的复合荧光颗粒以沸石咪唑酯骨架材料-8包覆稀土配合物Tb complex@ZIF-8的荧光纳米颗粒为内核层，以表面氟化修饰沸石咪唑酯骨架材料-90为外壳层，所述表面氟化修饰是指用带有氨基功能基团的氟化小分子为所述复合荧光颗粒构建一个超疏水性保护壳层。

2.权利要求1所述的超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)由六水合硝酸锌和2-甲基咪唑制备沸石咪唑酯骨架材料-8颗粒，并在制备过程中装载稀土配合物铽，得到具有绿色荧光的Tb complex@ZIF-8颗粒；

2)用种子诱导法，对得到的Tb complex@ZIF-8颗粒进行包覆，在水/乙醇混合溶液中，由六水合硝酸锌和咪唑-2-甲醛通过原位生长沸石咪唑酯骨架材料-90壳层，最终得到以沸石咪唑酯骨架材料-90为壳层，沸石咪唑酯骨架材料-8包覆稀土配合物为核心的复合荧光颗粒；

3)将得到的核壳结构的Tb complex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒分散于甲醇溶剂中加入氟化剂在70～100℃作用下通过醛胺缩合反应得到具有超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒；所述氟化剂为带有氨基功能基团的氟化小分子，选自2,4,6-三氟苄胺或3,5-双(三氟甲基)苄胺。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的稀土配合物、六水合硝酸锌和2-甲基咪唑的质量比为2.2～8.8:71.4～214.2:208.9～626.7。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中Tb complex@ZIF-8颗粒、六水合硝酸锌和咪唑-2-甲醛的质量比为10～15:3.7～11.1:4.8～14.4。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中乙醇和水的体积比1:1。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的氟化剂与Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90颗粒的摩尔比为3:1。

说明书

技术领域

本发明属于发光纳米材料合成技术领域，具体涉及一种超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒及其制备方法。

背景技术

随着对肿瘤的病变过程以及附属特征物的深入研究，许多特定蛋白质、多肽小分子等特征标志物被研究者所发现，在一定程度上，这些特征标志物能够作为一种检测信号源来反映人体中可能发生癌变的细胞或组织。受制于当前肿瘤治疗的治愈率低和高成本，发展早期肿瘤诊断技术来遏制肿瘤的发生也成为当今的研究热点问题之一。

而目前具有简单高效、精准可靠的悬浮阵列诊断技术是目前早期肿瘤诊断最新技术之一，悬浮阵列诊断技术是基于荧光编码微球为载体与流式细胞仪为检测平台这两个部分来构建。其中的核心技术是构建在生理环境中荧光稳定的编码微球。而目前市场上的荧光编码微球普遍都是以有机荧光团或量子点为客体染料。但有机荧光团和量子点染料存在着荧光易漂白、荧光强度低；半峰宽较宽及荧光寿命短；在各种含有大量离子、小分子和金属粒子的水溶液中存在荧光不稳定的等缺点。而稀土配合物因其具有很高的荧光强度，具有毫秒级的荧光寿命；大stokes位移，荧光激发谱带宽而连续，可用一个激发波长同时激发多种稀土配合物的荧光；荧光的发射峰窄(半峰宽10-15nm)、高色纯度等优点，被看作为一种具有巨大潜力的荧光染料，但稀土配合物在含有大量溶剂、离子、生物分子的悬浮阵列检测体系中，配体容易发生交换和脱除、非辐射跃迁而引起荧光的淬灭，给荧光分析带来巨大困难。

金属有机框架材料(MOF材料)被广泛作为荧光染料载体材料，其优势在于其多孔网状结构能够提高荧光染料的装载效率，同时也保证稀土配合物等荧光染料能够独立稳定发光而互不干扰。但MOF材料作为荧光染料载体材料也存在着以下两个方面的问题。第一，因为其多孔结构在离子、水相环境中，也无法限制离子和水渗透到MOF 内部淬灭荧光染料的荧光；第二，在外来阴离子对MOF材料中金属离子的强配位作用下，MOF材料的拓扑结构很容易出现非晶体化，从而影响颗粒内部荧光分子的空间结构，造成其荧光强度减弱甚至消失。

由此可知，现有制备技术依然存在着问题：由于待测环境中存在着各种离子的强配位作用，基于MOF材料为载体的复合荧光颗粒的常因结构不稳定导致稀土配合物配位结构发生改变，从而无法保证荧光稳定，很难应用于荧光标记领域。

发明内容

针对上述技术存在的不足之处，本发明的目的在于提供一种具有疏水性保护壳层的复合荧光颗粒的制备方法，该方法制备的复合荧光颗粒能够在含有复杂离子的检测环境中保持长时间稳定发光。

本发明具体通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒，所述的复合荧光颗粒以沸石咪唑酯骨架材料-8包覆稀土配合物Tb complex@ZIF-8的荧光纳米颗粒为内核层，以表面氟化修饰沸石咪唑酯骨架材料-90为外壳层。

在本发明的另一方面，提供了上述超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒的制备方法，包括以下步骤：

1)由六水合硝酸锌和2-甲基咪唑制备沸石咪唑酯骨架材料-8颗粒，并在制备过程中装载稀土配合物铽，得到具有绿色荧光的Tb complex@ZIF-8颗粒；

2)用种子诱导法，对得到的Tb complex@ZIF-8颗粒进行包覆，在水/乙醇混合溶液中，由六水合硝酸锌和咪唑-2-甲醛通过原位生长沸石咪唑酯骨架材料-90壳层，最终得到以沸石咪唑酯骨架材料-90 为壳层，沸石咪唑酯骨架材料-8包覆稀土配合物为核心的复合荧光颗粒；

3)将得到的核壳结构的Tb complex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒分散于甲醇溶剂中加入氟化剂在高温作用下通过醛胺缩合反应得到具有超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒。

进一步的，步骤(1)中所述的稀土配合物、六水合硝酸锌和2- 甲基咪唑的质量比为2.2～8.8:71.4～214.2:208.9～626.7。

进一步的，步骤(2)中Tb complex@ZIF-8颗粒、六水合硝酸锌和咪唑-2-甲醛的质量比为10～15:3.7～11.1:4.8～14.4。

进一步的，步骤(2)中乙醇和水的体积比1:1。

进一步的，步骤(3)中所述的氟化剂与Tb complex@ZIF-8@ZI F-90颗粒的摩尔比为3:1。

所述的氟化剂为带有氨基功能基团的氟化小分子，优选的，所述的氟化剂分子选自2,4,6-三氟苄胺或3,5-双(三氟甲基)苄胺。氟化剂能够为复合荧光颗粒提供一个超疏水性保护壳层。

具体地，由于咪唑-2-甲醛带有醛基功能基团，使得具有核壳结构的复合荧光颗粒表面壳层也带有醛基功能基团。所述的氟化剂都带有氨基功能基团，通过醛胺缩合与Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90颗粒最外表面的醛基发生反应，在缩小了微孔孔径的同时形成一个超疏水性保护壳层维持颗粒结构的稳定。

进一步的，步骤(3)中所述的高温条件为：70～100℃。

本发明的有益效果为：

本发明对复合荧光颗粒进行了表征。结果表明该复合荧光颗粒以 0.1mg mL-1的浓度在pH＝7.4的PBS缓冲液中，307nm波长下激发，荧光强度能达到145000，且能够在缓冲液中维持荧光性质的稳定长达数小时；同时复合荧光颗粒在PBS缓冲液中也具有较长荧光寿命，达1.8ms，且具有较高量子产率，达19.1％。所制备的复合荧光颗粒具有形貌规整，呈规则菱形十二面体，平均粒径为60±5nm，比表面积为1054m2·g-1，孔容为0.43cm3·g-1，具有良好的单分散性。该复合荧光颗粒在荧光成像和分析等领域具有巨大的应用潜力。

由于本申请加入的ZIF-90壳层和氟化剂，能够在ZIF-8颗粒表面包覆一层超疏水性壳层，从而能够维持颗粒结构的稳定同时防止溶剂中的小分子、离子进入微孔孔道猝灭配合物的荧光，进而增加了颗粒的荧光稳定性。

附图说明

图1是本发明实施例提供的复合荧光颗粒合成过程示意图；

图2是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的TEM照片；

图3是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的氮气吸附等温线；

图4是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的XPS谱图；

图5是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8(a)、Tb compl ex@ZIF-8@ZIF-90(b)和Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90(c)复合荧光颗粒的接触角测定照片；

图6是本发明实施例提供的ZIF-8、ZIF-90、Tb complex@ZIF-8 和Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的紫外吸收光谱；

图7是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的荧光激发和发射光谱图；

图8是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒在PBS缓冲液中的荧光寿命；

图9是本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8和Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒在PBS中的荧光稳定性。

具体实施方式

下面将结合本发明具体的实施例，对本发明技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种具有超疏水壳层的Tb complex@ZIF-8@F-ZI F-90复合荧光颗粒的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，首先，量取4mL 2-甲基咪唑(HMIM)甲醇溶液和2～4 mg Tb complex加入到10mL单口烧瓶；取4mL六水合硝酸锌 (Zn(NO3)2·6H2O)甲醇溶液和0.1mL十六烷基三甲基溴化胺(CTAB) 甲醇溶液配置得到硝酸锌溶液；然后在搅拌状态下，将硝酸锌溶液快速加入10mL单口烧瓶中，并在37℃下反应24h；

其中2-甲基咪唑甲醇溶液浓度为51～69mg·mL-1，六水合硝酸锌甲醇溶液浓度为18～24mg·mL-1，十六烷基三甲基溴化胺甲醇溶液为 73～97mg·mL-1。

步骤二，将步骤一中产物在9000～11000rpm的转速下离心5～10 min收集得到沉淀，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒。

步骤三，首先，称取10～15mg上述步骤二中所得到的Tb complex @ZIF-8荧光纳米颗粒和4～6mg六水合硝酸锌加入到5～7mL乙醇和水混合溶液，乙醇与水的体积比为1:1，形成硝酸锌溶液；然后，称取4.8～6.0mg咪唑-2-甲醛(ICA)溶于5～7mL乙醇和水混合溶液，加入到25mL单口烧瓶，60℃下搅拌直到咪唑-2-甲醛完全溶解；待反应液冷却到室温，将硝酸锌溶液快速加入25mL单口烧瓶，在25℃下反应3h。

步骤四，将步骤三中产物以10000～12000rpm转速离心10～15min 收集得到沉淀，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有核壳结构的Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒。

步骤五，首先，称取10～15mg上述步骤四中所得到的Tb complex @ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒溶于10mL甲醇中，加入到25mL单口烧瓶；然后，加入氟化剂，在70℃下回流24h。氟化剂为带氨基功能基团的氟化小分子类物质，包括2,4,6-三氟苄胺、3,5-双(三氟甲基)苄胺等，氟化剂的摩尔用量为0.176mol。

步骤六，将步骤五中产物以10000～12000rpm转速离心10～15 min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有超疏水性壳层保护的Tb complex@ZIF-8@F-ZI F-90复合荧光颗粒。

实施例1

如图1所示，本发明实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-9 0复合荧光颗粒合成过程示意图，本实施例提供的的Tb complex@ZI F-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒合成过程包括以下步骤：

步骤一，首先，称取200～220mg 2-甲基咪唑(HMIM)和2～4mg 稀土配合物铽加入到4～6mL甲醇溶液，加入到10mL单口烧瓶；将 71～76mg六水合硝酸锌(Zn(NO3)2·6H2O)和7～9mg十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)溶于4～6mL甲醇溶液，得到硝酸锌溶液；然后在搅拌状态下，将硝酸锌溶液快速加入单口烧瓶中，并在37℃下反应24h；最后，反应液以9000～11000rpm转速离心5～10min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒。

步骤二,首先，称取10～15mg上述步骤一中所得到的Tb complex @ZIF-8荧光纳米颗粒和4～6mg六水合硝酸锌加入到5～7mL乙醇和水混合溶液，形成硝酸锌溶液；然后，称取4.8～6.0mg咪唑-2-甲醛溶于5～7mL乙醇和水混合溶液中，加入到25mL单口烧瓶，60℃下搅拌直到咪唑-2-甲醛完全溶解；待反应液冷却到室温，将硝酸锌溶液快速加入25mL单口烧瓶中，在25℃下反应3h。最后，反应液以 10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有核壳结构的 Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒。

步骤三，首先，量取10～15mg上述步骤二中所得到的Tb comp lex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒溶于10～20mL甲醇中，加入到25 mL单口烧瓶；然后加入40～45mg 3,5-双(三氟甲基)苄胺，在70℃下回流24h。最后，反应液以10000～12000rpm转速离心10～15mi n收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到3,5-双(三氟甲基)苄胺修饰的超疏水性壳层保护的T b complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒。

如图2所示，制备得到的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的TEM照片，Tbcomplex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒尺寸均一，呈现菱形十二面体，粒径大小为60±5nm，证明了经过ZI F-90壳层的包覆和氟化修饰后，该复合荧光颗粒保持原有形貌。

如图3所示，Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的氮气吸附曲线属于典型Langmuir型等温线，证明了在经过氟化修饰后，该复合荧光颗粒依然保留着微孔结构。

如图4所示，Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒表面检测到大量的氟元素信号，也证明了Tb complex@ZIF-8@ZIF-90颗粒的表面成功修饰上氟化剂分子。

如图5所示，将Tb complex@ZIF-8、Tb complex@ZIF-8@ZIF- 90和Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90这三种复合荧光颗粒溶解在少量乙醇溶液中，制备成高浓度的乳浊液；然后，将三种复合荧光颗粒分别均匀悬涂在钛片上，形成一层均匀的颗粒涂层；最后，使用接触角测量仪测定出上述三种复合荧光颗粒的接触角结果。结果表明，Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒与Tb complex@ZIF-8、Tb complex@ZIF-8@ZIF-90这两种复合荧光颗粒相比较，其接触角的数值有明显增大。证明了Tb complex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒经过表面氟化修饰后，Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒表现出超疏水性。

如图6所示，分别取质量为0.1mg的纯ZIF-8、ZIF-90、Tb co mplex@ZIF-8和Tbcomplex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒分散于 1mL的去离子水中，用Nanodrop One扫描波长190-600nm,对紫外吸收光谱进行表征。紫外吸收光谱结果表明，纯ZIF-8颗粒和ZIF-90颗粒因具有咪唑环结构，分别在205nm和290nm处显示出其特征峰；Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的紫外吸收特征峰分别在204nm和293nm处，也证明了ZIF-90壳层的存在。

如图7所示，取0.5mg Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒分散在于5mL的去离子水中，取0.6mL的溶液置于微量比色皿中，使用荧光分光光度计测定其荧光激发和发射光谱。结果表明， Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒的荧光激发和发射光谱图可以看出最大激发波长在316nm处，最大发射波长在543nm处。

如图8所示，取0.5mg Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒分散在于5mL的PBS缓冲液中，制备浓度为0.1mg/mL的溶液；然后，取3mL的溶液置于比色皿中，使用荧光分光光度计测定其时间分辨荧光寿命。结果表明，荧光衰减曲线结果表明Tb comple x@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒具有长达毫米级(～1.8ms)的荧光寿命。

如图9所示，分别取质量为0.1mg的Tb complex@ZIF-8和Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒分散于1mL的PBS缓冲液中，配置成为0.1mg/mL的待测液，每隔一小时量取0.7mL于微量比色皿中，用荧光分光光度计进行荧光强度的表征，测定其荧光稳定性。结果表明，Tb complex@ZIF-8荧光颗粒在一个小时内荧光强度快速下降到零点，而Tbcomplex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒能够保持荧光稳定长达8小时以上，证明了构建的超疏水性壳层能够有效的保护Tb complex@ZIF-8的荧光稳定，不受水和各种离子的干扰。

实施例2

本实施例提供的的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒合成过程包括以下步骤：

步骤一，首先，称取200～220mg 2-甲基咪唑和2～4mg稀土配合物铽加入到4～6mL甲醇溶液，加入到10mL单口烧瓶；将71～76mg 六水合硝酸锌和7～9mg十六烷基三甲基溴化胺溶于4～6mL甲醇溶液，得到硝酸锌溶液；然后在搅拌状态下，将硝酸锌溶液快速加入单口烧瓶中，并在37℃下反应24h；最后，反应液以9000～11000rpm 转速离心5～10min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒。

步骤二,首先，称取10～15mg上述步骤一中所得到的Tb complex @ZIF-8荧光纳米颗粒和4～6mg六水合硝酸锌加入到5～7mL乙醇和水混合溶液，形成硝酸锌溶液；然后，称取4.8～6.0mg咪唑-2-甲醛溶于5～7mL乙醇和水混合溶液中，加入到25mL单口烧瓶，60℃下搅拌直到咪唑-2-甲醛完全溶解；待反应液冷却到室温，将硝酸锌溶液快速加入25mL单口烧瓶中，在25℃下反应3h。最后，反应液以 10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有核壳结构的 Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒。

步骤三，首先，量取10～15mg上述步骤二中所得到的Tb comp lex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒溶于10～20mL甲醇中，加入到25 mL单口烧瓶；然后加入20～30μl 2,4,6-三氟苄胺，在70℃下回流2 4h。最后，反应液以10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到2,4,6-三氟苄胺修饰的超疏水性壳层保护的Tb complex@ZIF-8 @F-ZIF-90复合荧光颗粒。

实施例3

本实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒合成过程包括以下步骤：

步骤一，首先，称取200～220mg 2-甲基咪唑和2～4mg稀土配合物铽加入到4～6mL甲醇溶液，加入到10mL单口烧瓶；将71～76mg 六水合硝酸锌和7～9mg十六烷基三甲基溴化胺溶于4～6mL甲醇溶液，得到硝酸锌溶液；然后在搅拌状态下，将硝酸锌溶液快速加入单口烧瓶中，并在37℃下反应24h；最后，反应液以9000～11000rpm 转速离心5～10min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒。

步骤二,首先，称取10～15mg上述步骤一中所得到的Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒和4～6mg六水合硝酸锌加入到5～7mL 乙醇和水混合溶液，形成硝酸锌溶液；然后，称取4.8～6.0mg咪唑-2- 甲醛溶于5～7mL乙醇和水混合溶液中，加入到25mL单口烧瓶，60℃下搅拌直到咪唑-2-甲醛完全溶解；待反应液冷却到室温，将硝酸锌溶液快速加入25mL单口烧瓶中，在25℃下反应3h。最后，反应液以10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有核壳结构的 Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒。

步骤三，首先，量取10～15mg上述步骤二中所得到的Tb com plex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒溶于10～20mL甲醇中，加入到2 5mL单口烧瓶；然后加入40～45mg 3,5-双(三氟甲基)苄胺，在1 00℃下回流24h。最后，反应液以10000～12000rpm转速离心10～1 5min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到3,5-双(三氟甲基)苄胺修饰的超疏水性壳层保护的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒。

实施例4

本实施例提供的Tb complex@ZIF-8@F-ZIF-90复合荧光颗粒合成过程包括以下步骤：

步骤一，首先，称取200～220mg 2-甲基咪唑和2～4mg稀土配合物铽加入到4～6mL甲醇溶液，加入到10mL单口烧瓶；将71～76mg 六水合硝酸锌和7～9mg十六烷基三甲基溴化胺溶于4～6mL甲醇溶液，得到硝酸锌溶液；然后在搅拌状态下，将硝酸锌溶液快速加入单口烧瓶中，并在37℃下反应24h；最后，反应液以9000～11000rpm 转速离心5～10min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到Tb complex@ZIF-8荧光纳米颗粒。

步骤二,首先，称取10～15mg上述步骤一中所得到的Tb complex @ZIF-8荧光纳米颗粒和4～6mg六水合硝酸锌加入到5～7mL乙醇和水混合溶液，形成硝酸锌溶液；然后，称取4.8～6.0mg咪唑-2-甲醛溶于5～7mL乙醇和水混合溶液中，加入到25mL单口烧瓶，60℃下搅拌直到咪唑-2-甲醛完全溶解；待反应液冷却到室温，将硝酸锌溶液快速加入25mL单口烧瓶中，在25℃下反应3h。最后，反应液以 10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到具有核壳结构的 Tbcomplex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒。

步骤三，首先，量取10～15mg上述步骤二中所得到的Tb comp lex@ZIF-8@ZIF-90复合荧光颗粒溶于10～20mL甲醇中，加入到25 mL单口烧瓶；然后加入20～30μl 2,4,6-三氟苄胺，在100℃下回流2 4h。最后，反应液以10000～12000rpm转速离心10～15min收集得到产物，并进一步用甲醇洗涤产物两次。将最终产物悬浮在甲醇中，得到2,4,6-三氟苄胺修饰的超疏水性壳层保护的Tb complex@ZIF-8 @F-ZIF-90复合荧光颗粒。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

一种超疏水性壳层保护的复合荧光颗粒及其制备方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。