专利摘要
本发明涉及博来霉素衍生物和用途。具体地，本发明一个方面涉及一种式I化合物或其药学可接受的盐，其中各取代基如说明书所述。本发明还涉及制备本发明化合物的方法，包含本发明化合物的药物组合物，以及本发明化合物在制备治疗肿瘤的药物中的用途。本发明化合物在治疗乳腺癌、肝癌、宫颈癌、结肠癌、皮肤癌、肺癌等方面是有益的。
权利要求
1.以下式I化合物或其药学可接受的盐：
R选自：NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3、NH(CH2)3NH(CH2)4NH2、NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2:
并且其中：
Ra和Rb一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环，Rc和Rd均为氢；
Ra和Rb均为氢，Rc和Rd一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环；或者
Ra和Rb一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环，Rc和Rd一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环。
2.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述药学可接受的盐是式I化合物与无机酸或者有机酸形成的盐；在一个实施方案中，所述药学可接受的无机酸盐包括但不限于式I化合物的盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等；在一个实施方案中，所述药学可接受的有机酸盐包括但不限于式I化合物的乙酸盐、丙酸盐、枸橼酸盐、酒石酸盐等。
3.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中所述式I化合物是选自下列的化合物：
4.制备权利要求1-3任一项所述化合物或其药学可接受的盐的方法，其包括以下步骤：
(1)在有机溶剂中，在酸存在下，使下式I0化合物
与2,2-二甲氧基丙烷在室温条件下进行反应；
(2)向步骤(1)所得反应液中加入丙酮，收集沉淀物，将所得沉淀物溶于水中，调节pH值至中性，干燥；
(3)将步骤(2)所得固体在凝胶柱上进行洗脱，以分离其中具有不同环化程度的产物的级份；
(4)将步骤(3)所得各级份分别经大孔树脂脱盐，除去溶剂，干燥，即得式I化合物；和任选的
(5)将步骤(4)所得式I化合物与无机酸或者有机酸反应得到药学可接受的盐，
其中，R选自：NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3、NH(CH2)3NH(CH2)4NH2、NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2:
5.根据权利要求4的方法，其中步骤(1)中：
所述的有机溶剂选自：二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、乙腈等；
所述式I0化合物与所述有机溶剂的重量比为1：100～1000，例如为1：200～800，例如为1：300～600；
所述的酸是无机酸，例如其选自：硫酸、盐酸、磷酸、硝酸等；
所述的酸在所述有机溶剂中的浓度为0.02～0.5mol/L，例如为0.05～0.25mol/L，例如为0.05～0.2mol/L；和/或
式I0化合物与2,2-二甲氧基丙烷的摩尔比为1：1～200，例如为1：2～150，例如为1：5～100，例如为1：5～50，例如为1：10～25。
6.根据权利要求4的方法，其中步骤(2)中，丙酮的体积是步骤(1)中所述有机溶剂体积的1～10倍，例如2～8倍，例如3～7倍。
7.根据权利要求4的方法，其中步骤(3)中：
使用凝胶柱是[NH4+]型柱，例如使用的是CM-Sephadex C-25型凝胶柱；
使用氯化铵水溶液为洗脱液进行洗脱；和/或
所述氯化铵水溶液的浓度为0.02～1mol/L，例如为0.05～0.5mol/L，例如为0.1～0.2mol/L。
8.根据权利要求4的方法，其中步骤(4)中，使用X-5大孔树脂进行脱盐处理。
9.一种药物组合物，其包含权利要求1-3任一项所述化合物或其药学可接受的盐以及药学可接受的载体或赋形剂。
10.权利要求1-3任一项所述化合物或其药学可接受的盐在制备治疗肿瘤的药物中的用途；在一个实施方案中，所述肿瘤包括各种良性和恶性肿瘤以及癌症，包括但不限于乳腺癌、肝癌、宫颈癌、结肠癌、皮肤癌、肺癌。
说明书
技术领域
本发明涉及一种新颖的糖肽类抗生素及其药学可接受的盐，特别是涉及一类博来霉素的衍生物。本发明还涉及该类化合物的制备方法以及它们在制备抗肿瘤药物中的用途。
背景技术
现有的从轮枝链霉菌(Streptomyces verticillus)的发酵培养基中发现的博来霉素(又称博莱霉素)族化合物，是一类糖肽类抗肿瘤抗生素(Pittillo RF,Woolley C,Rice LS.Bleomycin,an Antitumor Antibiotic:Improved Microbiological Assay and Tissue Distribution Studies in Normal Mice[J].Appl Microbiol,1971,22(4):564)。本发明的发明人在轮枝链霉菌平阳新种(Streptomyces verticillus var.pingyangensis n.var.)发酵培养基中曾相继纯化得到平阳霉素即博来霉素A5(许鸿章,张鹤镛.平阳霉素的分离和鉴别[J].药学学报,1980；15(10):609)、博安霉素即博来霉素A6(许鸿章,戴丽华,张鹤镛.争光霉素A6和它在争光霉素复合物中的地位[J].药学学报,1988,23(9):667)、博宁霉素(Z-893)(CN1231340A；许鸿章,于雷,张秀荣,王世镛.博宁霉素(Z-893)的分离纯化和结构测定[J].中国抗生素杂志2003,28(8):465)、NC0604(CN101628931A)。
博来霉素族抗生素具有下式所示的结构：
其中某些化合物的R基团分别为：
博来霉素A1：-NH(CH2)3S(O)CH3，
博来霉素A2：-NH(CH2)3S(CH3)2，
博来霉素A5：-NH(CH2)3NH(CH2)4NH2，又称为平阳霉素，
博来霉素A6：-NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2，又称为博安霉素，
博来霉素B1：-NH2，
博来霉素B2：-NH(CH2)4NHC(＝NH)NH2，
Z-893：-NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3，又称为博宁霉素，
NC0604：-NH(CH2)3NH(CH2)4NHCH2CH2CONH2。
尽管有诸多博来霉素族化合物显示具有有效的抗肿瘤活性甚至尝试用于动物甚至人体治疗，然而本领域仍然期待具有例如优异生物学活性和/或优异药学性质的化合物例如博来霉素衍生物提供给临床使用。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有例如更高生物学活性和/或更优药学性质的化合物例如博来霉素衍生物。本发明人以博来霉素族化合物例如博宁霉素、平阳霉素、博安霉素为起始原料，将其中古洛糖和/或甘露糖环上的4位-、6位-羟基与丙叉基连接形成六元环，形成新的博来霉素衍生物，出人意料地发现这些新的博来霉素衍生物不但具有优异的生物学活性，而且具有优异的药学性质。本发明基于此发现而得以完成。
为此，本发明第一方面提供了以下式I化合物或其药学可接受的盐：
R选自：NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3、NH(CH2)3NH(CH2)4NH2、NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2；
并且其中：
Ra和Rb一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环，Rc和Rd均为氢；
Ra和Rb均为氢，Rc和Rd一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环；或者
Ra和Rb一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环，Rc和Rd一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环。
在本发明中，短语“Ra和Rb一起为丙叉基并且与它们各自连接的氧原子一起形成六元环”，以式I化合物中古洛糖上的4位-、6位-羟基与丙叉基连接形成六元环为例，是指形成具有以下结构的六元环：
类似表述的短语亦具有类似含义。
根据本发明第一方面的化合物或其药学可接受的盐，其中所述药学可接受的盐是式I化合物与无机酸或者有机酸形成的盐。在一个实施方案中，所述药学可接受的无机酸盐包括但不限于式I化合物的盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等。在一个实施方案中，所述药学可接受的有机酸盐包括但不限于式I化合物的乙酸盐、丙酸盐、枸橼酸盐、酒石酸盐等。在一个实施方案中，所述药学可接受的盐是式I化合物的盐酸盐。
根据本发明第一方面的化合物或其药学可接受的盐，其中所述式I化合物是选自下列的化合物：式I-1化合物、式I-2化合物、式I-3化合物、式I-4化合物、式I-5化合物、式I-6化合物、式I-7化合物、式I-8化合物、式I-9化合物。根据本发明第一方面的化合物或其药学可接受的盐，其中所述式I化合物是选自以下式I-1至I-9的化合物：
进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案所述化合物的方法，其包括以下步骤：
(1)在有机溶剂中，在酸存在下，使下式I0化合物
与2,2-二甲氧基丙烷在室温条件下进行反应；
(2)向步骤(1)所得反应液中加入丙酮，收集沉淀物，将所得沉淀物溶于水中，调节pH值至中性，干燥；
(3)将步骤(2)所得固体在凝胶柱上进行洗脱，以分离其中具有不同环化程度的产物的级份；
(4)将步骤(3)所得各级份分别经大孔树脂脱盐，除去溶剂，干燥，即得式I化合物；和任选的
(5)将步骤(4)所得式I化合物与无机酸或者有机酸反应得到药学可接受的盐，
其中，R选自：NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3、NH(CH2)3NH(CH2)4NH2、NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2；
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中所述的有机溶剂选自：二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇等。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，所述式I0化合物与所述有机溶剂的重量比为1：100～1000，例如为1：200～800，例如为1：300～600。众所周知，反应溶剂的用量是本领域技术人员可以根据实际情况灵活地调整的，并且本发明人已经发现在上述各种宽泛的范围内对于本发明都是适用的。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中所述的酸是无机酸。在一个实施方案中，所述的无机酸选自：硫酸、盐酸、磷酸、硝酸等。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中所述的酸在所述有机溶剂中的浓度为0.02～0.5mol/L，例如为0.05～0.25mol/L，例如为0.05～0.2mol/L。众所周知，对于本发明反应条件而言，酸在有机中的用量是本领域技术人员可以根据实际情况灵活地调整的，并且本发明人已经发现在上述各种宽泛的范围内对于本发明都是适用的。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，式I0化合物与2,2-二甲氧基丙烷的摩尔比为1：1～200，例如为1：2～150，例如为1：5～100，例如为1：5～50，例如为1：10～25。众所周知，对于本发明反应条件而言，式I0化合物与2,2-二甲氧基丙烷的投料比是本领域技术人员可以根据实际情况灵活地调整的，并且本发明人已经发现在上述各种宽泛的范围内对于本发明都是适用的。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(2)中，丙酮的体积是步骤(1)中所述有机溶剂体积的1～10倍，例如2～8倍，例如3～7倍。添加丙酮的目的在于将所生成的产物沉淀，已经发现，在上述各种宽泛的范围内对于本发明都是适用的。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，使用凝胶柱是[NH4+]型柱，例如使用的是CM-Sephadex C-25型凝胶柱。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，使用氯化铵水溶液为洗脱液进行洗脱。在一个实施方案中，所述氯化铵水溶液的浓度为0.02～1mol/L，例如为0.05～0.5mol/L，例如为0.1～0.2mol/L。已经发现在上述各种宽泛的范围内对于本发明都是适用的。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，分取不同的洗脱级份可分别得到：古洛糖羟基与丙叉基连接形成六元环的产物、甘露糖羟基与丙叉基连接形成六元环的产物、古洛糖和甘露糖的羟基均与丙叉基连接形成两个六元环的产物。这些产物级份的化学结构可以通过后续的光谱数据容易地确定。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(4)中，使用X-5大孔树脂进行脱盐处理。
本发明第三方面提供了一种药物组合物，其包含本发明第一方面所述化合物或其药学可接受的盐以及药学可接受的载体或赋形剂。基于本发明式I化合物的生物学活性，本发明的药物组合物可用作抗肿瘤药物。
本发明第四方面提供了本发明第一方面所述化合物或其药学可接受的盐在制备治疗肿瘤的药物中的用途。
本发明第五方面提供了在有需要的受试者中治疗肿瘤的方法，其包括给所述受试者施用治疗有效量的本发明第一方面所述化合物或其药学可接受的盐。
本发明第六方面提供了用于治疗肿瘤的药物，其包含本发明第一方面所述化合物或其药学可接受的盐，以及任选的药学可接受的载体或赋形剂。
根据本发明，所述肿瘤包括各种良性和恶性肿瘤以及癌症，包括但不限于乳腺癌、肝癌、宫颈癌、结肠癌、皮肤癌、肺癌。
本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。下面对本发明作进一步的描述。
本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。
在本发明中，式I化合物亦可称为化合物I、I化合物、式I等，其它化合物亦可类似地表示。
制备本发明化合物所使用的原料，即式I0化合物，它们是本领域公知的，即博宁霉素、平阳霉素、博安霉素。它们分别具有如下化学结构：
其中
博宁霉素的R＝NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NHCOCH3
平阳霉素的R＝NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
博安霉素的R＝NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2
本发明人付出大量努力，制备得到了本发明的一些典型的化合物，利用多种化学分析方法例如多种光谱法对新化合物结构进行鉴定，利用MTT法测定化合物对几株人类肿瘤细胞的细胞毒性。结果表明，本发明的一些典型的化合物对几株肿瘤细胞表现出良好的生长抑制作用。
另外，本发明人在实验中已经发现，本发明化合物具有显著低的肺毒性。羟脯氨酸(HYP)含量变化是反映肺毒性的一个指标，羟脯氨酸含量升高说明肺毒性增强。本发明采用本领域技术人员公知的经典方法测定化合物的肺毒性，在对昆明种小白鼠分别连续腹腔注射博宁霉素、平阳霉素、博安霉素以及本发明化合物(均为50mg药物/kg体重/天)16天，停药28天后处死，检测肺组织HYP含量(μg/mg组织湿重)，结果表明：式I-1化合物、式I-2化合物、式I-7化合物三者的HYP值是博宁霉素HYP值的0.69～0.75倍；式I-3化合物、式I-4化合物、式I-8化合物三者的HYP值是平阳霉素HYP值的0.72～0.77倍；式I-5化合物、式I-6化合物、式I-9化合物三者的HYP值是博安霉素HYP值的0.70～0.78倍。这种结果是完全出人意料的。
本发明所述的化合物及其在药学上可接受的盐具有较好的抗肿瘤活性，可用于制备抗肿瘤药物。
在本发明制备式I化合物的方法中，反应所用的各种原材料是本领域技术人员根据已有知识可以制备得到的，或者是可以通过文献公知的方法制得的，或者是可以通过商业购得的。以上反应方案中所用的中间体、原材料、试剂、反应条件等均可以根据本领域技术人员已有知识可以作适当改变的。
本发明的式I化合物可以与其它活性成分组合使用，只要它不产生其他不利作用，例如过敏反应。
本发明式I所示的活性化合物可作为唯一的抗肿瘤药物使用，或者可以与一种或多种其他抗肿瘤药物联合使用。联合治疗通过将各个治疗组分同时、顺序或隔开给药来实现。
本文所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。在本发明中，术语“组合物”可以与“药物组合物”互换使用。
本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药学可接受的盐的形式使用。词语“药学可接受的盐”指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果/风险比相称的盐。药学可接受的盐是本领域公知的。例如，S.M.Berge,et al.,J.Pharmaceutical Sciences,1977,66:1中对药学可接受的盐进行了详细描述。所述盐可通过使本发明化合物的游离碱官能度与合适的有机酸反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。代表性的酸加成盐包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐(异硫代硫酸盐，isothionate)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同样，碱性含氮基团可用以下物质季铵化：低级烷基卤化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；长链卤化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基卤化物如苄基溴和苯乙基溴及其他。因此得到可溶于或分散于水或油的产品。可用来形成药学可接受的酸加成盐的酸实例包括无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及有机酸如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。
本发明式I化合物还包括其异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯，本发明式I化合物以及它的异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯还可以形成溶剂合物，例如水合物、醇合物等。上述化合物还可以是前药或可在体内代谢变化后释放出所述活性成分的形式。选择和制备适当的前药衍生物是本领域技术人员公知技术。一般来说，对于本发明的目的，与药学可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。
可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。
当用于上述治疗和/或预防或其他治疗和/或预防时，治疗和/或预防有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药学可接受的酯或前药形式(在存在这些形式的情况下)应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语“治疗和/或预防有效量”的本发明化合物指以适用于任何医学治疗和/或预防的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明式I化合物用于哺乳动物特别是人的剂量可以介于0.001～1000mg/kg体重/天，例如介于0.01～100mg/kg体重/天，例如介于0.01～10mg/kg体重/天。
运用本领域技术人员熟悉的药物载体可以制备成含有效剂量的本发明化合物的药物组合物。因此本发明还提供包含与一种或多种无毒药物可接受载体配制在一起的本发明化合物的药物组合物。所述药物组合物可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。
所述的药物组合物可配制成许多剂型，便于给药，例如，口服制剂(如片剂、胶囊剂、溶液或混悬液)；可注射的制剂(如可注射的溶液或混悬液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射水可立即使用)。所述的药物组合物中载体包括：口服制剂使用的粘合剂(如淀粉，通常是玉米、小麦或米淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮)，稀释剂(如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素，和/或甘油)，润滑剂(如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐，通常是硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇)，以及如果需要，还含有崩解剂，如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐，通常是藻酸钠，和/或泡腾混合物，助溶剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等，可注射的制剂使用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可以将其配制成肠衣片剂。
更具体地说，本发明的药物组合物可通过口服、直肠、胃肠外、池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过散剂、软膏剂或滴剂)、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。本文所用术语“胃肠外”指包括静脉内、肌肉内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。
适合于胃肠外注射的组合物可包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，及供重构成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。合适的含水或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、植物油(如橄榄油)、可注射有机酯如油酸乙酯及它们的合适混合物。
这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如尼泊金酯类、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可确保防止微生物的作用。还期望包括等渗剂，例如糖类、氯化钠等。通过使用能延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可达到可注射药物形式的延长吸收。
混悬剂中除活性化合物外还可含有悬浮剂，例如乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶或者这些物质的混合物等。
在一些情况下，为延长药物的作用，期望减慢皮下或肌内注射药物的吸收。这可通过使用水溶性差的晶体或无定形物质的液体混悬剂来实现。这样，药物的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又可取决于晶体大小和晶型。或者，胃肠外给药的药物形式的延迟吸收通过将该药物溶解于或悬浮于油媒介物中来实现。
可注射贮库制剂形式可通过在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯(polylactide-polyglycolide)中形成药物的微胶囊基质来制备。可根据药物与聚合物之比和所采用的具体聚合物的性质，对药物释放速度加以控制。其他生物可降解聚合物的实例包括聚原酸酯类(poly(orthoesters))和聚酐类(poly(anhydrides))。可注射贮库制剂也可通过将药物包埋于能与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。
可注射制剂可例如通过用滤菌器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质。
本发明化合物或其组合物可用口服方法或非胃肠道给药方式。口服给药可以是片剂、胶囊剂、包衣剂，肠道外用药制剂有注射剂和栓剂等。这些制剂是按照本领域的技术人员所熟悉的方法制备的。为了制造片剂、胶囊剂、包衣剂所用的辅料是常规用的辅料，例如淀粉、明胶、阿拉伯胶，硅石，聚乙二醇，液体剂型所用的溶剂如水、乙醇、丙二醇、植物油(如玉米油、花生油、橄榄油等)。含有本发明化合物的制剂中还有其它辅料，例如表面活性剂，润滑剂，崩解剂，防腐剂，矫味剂和色素等。在片剂、胶囊剂、包衣剂、注射剂和栓剂中含有本发明式I化合物的剂量是以单元剂型中存在的化合物量计算的。在单元剂型中本发明式I化合物一般含量为0.01-5000mg，优选的单元剂型含有0.1-500mg，更优选的单元剂型含有1-300mg。具体地说，本发明可以提供的供口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性的药物可接受赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶；c)保湿剂如甘油；d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂如石蜡；f)吸收加速剂如季铵化合物；g)湿润剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h)吸附剂如高岭土和膨润土以及i)润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型中也可包含缓冲剂。
相似类型的固体组合物使用赋形剂例如乳糖及高分子量聚乙二醇等，也可用作软胶囊和硬胶囊中的填充物。
片剂、糖衣丸剂(dragees)、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可与包衣和壳料如肠溶衣材和医药制剂领域公知的其他衣材一起制备。这些固体剂型可任选含有遮光剂，且其组成还可使其只是或优先地在肠道的某个部位任选以延迟方式释放活性成分。可以使用的包埋组合物的实例包括高分子物质和蜡类。如果适合，活性化合物也可与一种或多种上述赋形剂配成微囊形式。
供口服给药的液体剂型包括药学可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型除含有活性化合物外还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇(tetrahydrofurfuryl alcohol)、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及它们的混合物。口服组合物除包含惰性稀释剂外还可包含辅料，例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香味剂。
供直肠或阴道给药的组合物优选是栓剂。栓剂可通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，它们在室温下为固体，但在体温下则为液体，因此可在直肠腔或阴道腔内熔化而释放出活性化合物。
本发明的化合物及其组合物还考虑用于局部给药。供局部给予本发明化合物的剂量形式包括散剂、喷雾剂、软膏剂和吸入剂。在无菌条件下将活性化合物与药学可接受的载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用制剂、眼软膏剂、散剂和溶液剂也被考虑在本发明范围内。
本发明化合物也可以脂质体形式给药。如本领域所公知，脂质体通常用磷脂或其他脂类物质制得。脂质体由分散于含水介质中的单层或多层水化液晶所形成。任何能够形成脂质体的无毒、生理上可接受和可代谢的脂质均可使用。脂质体形式的本发明组合物除含有本发明化合物外，还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类是天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，它们可单独或者一起使用。形成脂质体的方法是本领域公知的。参见例如Prescott,Ed.,Methods in Cell Biology,Volume XIV,Academic Press,New York,N.Y.(1976),p.33。
具体实施方式
下面通过具体的制备实施例和生物学试验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和试验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。
实施例1、制备本发明化合物
将5mg博宁霉素溶于2mL的DMF中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的15摩尔倍)，向反应液中通入HCl气体使HCl在溶液中的浓度达到0.1mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入8mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于5mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.12mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-1、化合物I-2和化合物I-7的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内，分别为31％、26％、14％)。
实施例2、制备本发明化合物
将5mg平阳霉素溶于2mL的DMF中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的20摩尔倍)，向反应液中通入HCl气体使HCl在溶液中的浓度达到0.1mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入10mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于4mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.1mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-3、化合物I-4和化合物I-8的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内)。
实施例3、制备本发明化合物
将5mg博安霉素溶于2mL的DMF中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的10摩尔倍)，向反应液中通入HCl气体使HCl在溶液中的浓度达到0.1mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入6mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于6mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.1mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-5、化合物I-6和化合物I-9的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内)。
使用以上实施例1-3所得各化合物进行下文的结构确认工作。
实施例4、制备本发明化合物
将5mg博宁霉素溶于1mL的二甲基亚砜中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的5摩尔倍)，向反应液中加入硫酸使该酸在溶液中的浓度达到0.05mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入8mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于5mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.2mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-1、化合物I-2和化合物I-7的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内)，经比对，三个化合物分别与实施例1所得三个化合物相同。
实施例5、制备本发明化合物
将5mg平阳霉素溶于4mL的丙酮中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的50摩尔倍)，向反应液中加入硝酸使该酸在溶液中的浓度达到0.25mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入8mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于4mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.5mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-3、化合物I-4和化合物I-8的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内)，经比对，三个化合物分别与实施例2所得三个化合物相同。
实施例6、制备本发明化合物
将5mg博安霉素溶于3mL的乙酸乙酯中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(其量是式I0化合物的25摩尔倍)，向反应液中通入HCl气体使HCl在溶液中的浓度达到0.1mol/L，在室温下搅拌使反应完全。向反应后所得液体中加入15mL丙酮，搅拌均匀，静置，使沉淀，滤取沉淀。将所得沉淀溶于6mL水中，调pH值至中性，冷冻干燥。所得固体过CM-Sephadex C-25凝胶用0.05mol/L的氯化铵溶液洗脱，用UV分光光度计(254nm)监测洗脱级份，分取各洗脱级份(用后面获得的纯品经结构确证后，可反推这些洗脱级份的化学归属)，将各洗脱级分分别经X-5大孔树脂脱盐，旋蒸除丙酮，冷冻干燥，分别得到经结构确证为化合物I-5、化合物I-6和化合物I-9的干燥品(三者的摩尔收率均在15～35％范围内)，经比对，三个化合物分别与实施例3所得三个化合物相同。
实施例11、理化性质及结构测定
针对实施例1、实施例2、实施例3所得的各编号化合物，根据本领域公知的方法，测定它们的理化性质及结构。
(1)化合物I-1
化合物I-1为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-1的紫外光谱在243～245nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。博宁霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-1与博宁霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-1的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-1的化学位移与已经报道的博宁霉素的化学位移进行了比较，其结构中各部分的编号(见下文)沿用了早期有关博莱霉素的报道中的编号惯例。
通过比较，两者除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-1的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-1的ESI-MS可以看出，1579.98为分子离子峰[M+H]+，791.23为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，528.06为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，化合物I-1的分子量约为1579，比博宁霉素分子量1539.69大40个质量数。与博宁霉素相比，化合物I-1增加的40质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加3个碳信号：δC102.510、δC20.740、δC31.038。
HSQC谱表明δH1.47与δC20.740处的信号相对应，δH1.38对应δC31.038。结合DEPT谱可判断δC20.740和δH1.47、δC31.038和δH1.38分别属于两个甲基。
HMBC显示δC102.510与δH1.47、δH1.38均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.38与δC72.605(G-4)和δC64.868(G-6)有相关，δC102.510与δH3.36(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-1的结构式如下，分子式C65H102N20O22S2：
(2)化合物I-2
化合物I-2为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-2的紫外光谱在243～244nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。博宁霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-2与博宁霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-2的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-2的化学位移与已经报道的博宁霉素的化学位移进行了比较。
通过比较，除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-2的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-2的ESI-MS可以看出，1619.88为分子离子峰[M+H]+，810.77为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，541.27为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，因此化合物I-2的分子量约为1619，比博宁霉素分子量1539.69大80个质量数。与博宁霉素相比，化合物I-2增加的80质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加6个碳信号：δC102.600、δC20.773、δC31.072、δC104.262、δC21.329、δC30.963。
HSQC谱表明δH1.47与δC20.773处的信号相对应，δH1.37对应δC31.072，δH1.60与δC21.329处的信号相对应，δH1.47对应δC30.963。结合DEPT谱可判断δC20.773和δH1.47、δC31.072和δH1.37、δC21.329和δH1.60、δC30.963和δH1.47分别属于四个甲基。
HMBC显示δC102.600与δH1.47、δH1.37均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.37与δC72.563(G-4)和δC64.887(G-6)有相关，δC102.600与δH3.43～3.35(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
HMBC显示δC104.262与δH1.60、δH1.47均相关，因此断定在甘露糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.47与δC71.173(M-4)和δC64.304(M-6)有相关，δH1.47与δC67.959(M-5)有相关,δC104.262与δH4.03～3.91(M-6)有相关，判断丙叉基与甘露糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-2的结构式如下，分子式C68H106N20O22S2：
另外，照针对化合物I-1的理化性质及结构测定方法，分析化合物I-7，结果显示其是在甘露糖的两个羟基处结合了一个丙叉基，而在古洛糖上的4位、6位羟基未结合丙叉基的博宁霉素衍生物，其结构式如下(其结构确证和理化性质的数据未进一步提供)：
(3)化合物I-3
化合物I-3为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-3的紫外光谱在242～244nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。平阳霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-3与平阳霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-3的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-3的化学位移与已经报道的平阳霉素的化学位移进行了比较。
通过比较，除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-3的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-3的ESI-MS可以看出，1480.49为分子离子峰[M+H]+，741.04为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，494.78为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，化合物I-3的分子量约为1480，比平阳霉素分子量1440.56大40个质量数。与平阳霉素相比，化合物I-3增加的40质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加3个碳信号：δC102.496、δC20.740、δC31.036。
HSQC谱表明δH1.48与δC20.740处的信号相对应，δH1.38对应δC31.036。结合DEPT谱可判断δC20.740和δH1.48、δC31.036和δH1.38分别属于两个甲基。
HMBC显示δC102.496与δH1.48、δH1.38均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.38与δC72.603(G-4)和δC64.808(G-6)有相关，δC102.496与δH3.35(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-3的结构式如下，分子式C60H93N19O21S2：
(4)化合物I-4
化合物I-4为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-4的紫外光谱在242～244nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。平阳霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-4与平阳霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-4的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-4的化学位移与已经报道的平阳霉素的化学位移进行了比较。
通过比较，两者除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-4的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-4的ESI-MS可以看出，1520.63为分子离子峰[M+H]+，761.16为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，508.32为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，化合物I-4的分子量约为1520，比平阳霉素分子量1440.56大80个质量数。与平阳霉素相比，化合物I-4增加的80质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加6个碳信号：δC102.504、δC20.727、δC31.038、δC104.191、δC21.294、δC30.919。
HSQC谱表明δH1.48与δC20.727处的信号相对应，δH1.38对应δC31.038，δH1.61与δC21.294处的信号相对应，δH1.491对应δC30.919。结合DEPT谱可判断δC20.727和δH1.48、δC31.038和δH1.38、δC21.294和δH1.61、δC30.919和δH1.491分别属于四个甲基。
HMBC显示δC102.504与δH1.48、δH1.38均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.38与δC72.559(G-4)和δC64.808(G-6)有相关，δC102.504与δH3.37(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
HMBC显示δC104.191与δH1.61、δH1.49均相关，因此断定在甘露糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.49与δC71.123(M-4)和δC64.255(M-6)有相关，δH1.49与δC67.885(M-5)有相关,δC104.191与δH4.03～3.92(M-6)有相关，判断丙叉基与甘露糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-4的结构式如下，分子式C63H97N19O21S2：
另外，照针对化合物I-3的理化性质及结构测定方法，分析化合物I-8，结果显示其是在甘露糖的两个羟基处结合了一个丙叉基，而在古洛糖上的4位、6位羟基未结合丙叉基的平阳霉素衍生物，其结构式如下(其结构确证和理化性质的数据未进一步提供)：
(5)化合物I-5
化合物I-5为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-5的紫外光谱在242～244nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。博安霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-5与博安霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-5的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-5的化学位移与已经报道的博安霉素的化学位移进行了比较。
通过比较，两者除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-5的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-5的ESI-MS可以看出，1537.61为分子离子峰[M+H]+，769.58为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，513.87为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，化合物I-5的分子量约为1537，比博安霉素分子量1497.66大40个质量数。与博安霉素相比，化合物I-5增加的40质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加3个碳信号：δC102.496、δC20.740、δC31.038。
HSQC谱表明δH1.48与δC20.740处的信号相对应,δH1.38对应δC31.038。结合DEPT谱可判断δC20.740和δH1.48、δC31.038和δH1.38分别属于两个甲基。
HMBC显示δC102.496与δH1.48、δH1.38均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.38与δC72.601(G-4)和δC64.868(G-6)有相关，δC102.496与δH3.35(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-5的结构式如下，分子式C63H100N20O21S2：
(6)化合物I-6
化合物I-6为无定形白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、二甲基甲酰胺，微溶于乙醇，不溶于丙酮和氯仿等低极性有机溶剂。
化合物I-6的紫外光谱在242～244nm、290～292nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。博安霉素的紫外光谱在243～245nm、290～293nm处有两个最大吸收峰，峰高比值为1.23。因此断定化合物I-6与博安霉素有相似的生色团和助色团。
1H-NMR谱在δH7～9ppm有四个芳香质子信号，分别归属为博莱霉素分子主核中两个噻唑环和咪唑环的四个质子，它们是博莱霉素族化合物具有鉴别意义的特征。
根据早期报道的博莱霉素族化合物的13C-NMR，对照已知化学位移数据及1H-13C COSY，HSQC和HMBC，我们对化合物I-6的核磁共振谱进行了研究并对13C信号进行了归属，见表1。在表1中，同时将化合物I-6的化学位移与已经报道的博安霉素的化学位移进行了比较。
通过比较，除糖基外碳原子的化学位移能够很好的吻合，因此，断定这两种化合物仅区别于糖基部分。利用1H-NMR，13C-NMR，gCOSY，HMBC，HSQC，DEPT谱，可以将化合物I-6的大多数13C信号进行归属。
从化合物I-6的ESI-MS可以看出，1577.62为分子离子峰[M+H]+，789.59为双电荷分子离子峰[M+2H]2+，527.04为三电荷分子离子峰[M+3H]3+，QQ的分子量约为1577，比博安霉素分子量1497.66大80个质量数。与博安霉素相比，化合物I-6增加的80质量数发生在糖基部分。
13C谱新增加6个碳信号：δC102.498、δC20.729、δC31.036、δC104.185、δC21.294、δC30.917。
HSQC谱表明δH1.47与δC20.729处的信号相对应，δH1.37对应δC31.036，δH1.61与δC21.294处的信号相对应，δH1.49对应δC30.917。结合DEPT谱可判断δC20.729和δH1.47、δC31.036和δH1.37、δC21.294和δH1.61、δC30.917和δH1.49分别属于四个甲基。
HMBC显示δC102.498与δH1.47、δH1.37均相关，因此断定在古洛糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.37与δC72.555(G-4)和δC64.803(G-6)有相关，δC102.498与δH3.36(G-6)有相关，判断丙叉基与古洛糖的4位、6位羟基连接。
HMBC显示δC104.185与δH1.61、δH1.49均相关，因此断定在甘露糖的两个羟基结合了一个丙叉基，因而出现化学位移在100ppm左右的13C信号。δH1.49与δC71.119(M-4)和δC64.249(M-6)有相关，δH1.49与δC67.882(M-5)有相关,δC104.185与δH4.09～3.92(M-6)有相关，判断丙叉基与甘露糖的4位、6位羟基连接。
最终确证，化合物I-6的结构式如下，分子式C66H104N20O21S2：
另外，照针对化合物I-5的理化性质及结构测定方法，分析化合物I-9，结果显示其是在甘露糖的两个羟基处结合了一个丙叉基，而在古洛糖上的4位、6位羟基未结合丙叉基的博安霉素衍生物，其结构式如下(其结构确证和理化性质的数据未进一步提供)：
为了便于描述结构确证的各数据，对各化合物示意性地划分成不同的基团部分，例如划分成以下I、II、III、IV、V、VI、G、M、R九个基团部分区域，并且R部分的各个碳原子的编号可以如a、b、c、d、e、f、g、h、i、j所示标注。
这样，化合物I-1、化合物I-3、化合物I-5的结构可以示意性地描述如下：
化合物I-2、化合物I-4、化合物I-6的结构可以示意性地描述如下：
表1：化合物I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6的13C-NMR(600MHz，D2O)数据
表2：化合物I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6的1H-NMR(600MHz，D2O)数据
博来霉素衍生物和用途专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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