专利摘要

本发明涉及一种利用CRISPR/Cas9系统构建的基因条件性敲除方法：在待敲除区域左侧和右侧分别选取LoxP‑抗生素‑LoxP和FRT‑抗生素‑FRT‑LoxP序列插入位点；在待插入位点的上下游选取左右同源臂，扩增并纯化，酶切、连接和转化，从而得到包含左侧打靶质粒和右侧打靶质粒；将Cas9质粒、敲除区域左侧或右侧打靶质粒，及其相对应的gRNA表达质粒顺序导入或同时导入目的细胞中，转染后用抗生素筛选，筛选出同时插入了左侧和右侧打靶序列的目的细胞；用4‑OHT和DOX分别诱导Cre‑LoxP和FLP‑FRT介导的同源重组，从而在待敲除区域的左侧和右侧导入loxp位点；用4‑OHT诱导Cre‑LoxP介导的同源重组，得到目的片段敲除的克隆。

专利附图

利用CRISPR/Cas9系统构建的基因条件性敲除方法专利购买费用说明

Q：办理专利转让的流程及所需资料

A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。

1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。

2：按规定缴纳著录项目变更手续费。

3：同时提交相关证明文件原件。

4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。

Q:专利著录项目变更费用如何缴交

A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式

Q：专利转让变更，多久能出结果

A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。