专利摘要
一种从双子叶植物根及下胚轴中分离维管束的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： P1：选取植物种子，经表面消毒后播种至培养基并培养； P2：选取P1中生长健壮的完整植株，去除叶片，留取根和下胚轴，置于离心管中； P3：向P2的离心管中加入含有体积分数0.1％茶皂素的PEM缓冲液，浸泡30‑40分钟，然后用PEM缓冲液润洗，将润洗后的材料在含体积分数4％多聚甲醛的PBS缓冲液中固定30‑40分钟，然后再次用PEM缓冲液冲洗； P4：在解剖显微镜下，用解剖针将维管束与其相邻组织分开，并将维管束取出，放入装有PEM缓冲液的离心管中； P5：取P4中解剖后的材料，放入含有纤维素酶和果胶酶的酶液中，于28℃消化处理； P6：将P5中消化完全的材料放入Triton X‑100中清洗15‑20分钟，然后用PEM缓冲液冲洗，冲洗完毕后即完成对植物根及下胚轴中维管束的分离。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤P5中，所述酶液的组分包括：5mM MES缓冲液，0.5％(w/v)纤维素酶，0.2％(w/v)果胶酶，0.12M蔗糖和1mM CaCl2，并调节pH为 5.5。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PEM缓冲液包括：50mM PIPES、5mM EGTA、2.5mM MgSO4，并调节pH为6.9。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤P1中，在通风橱内用氯气对植物种子进行表面消毒。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤P1中，将表面消毒后的种子播种至MS培养基上，在16h光照/8h黑暗，22‑23℃条件下培养7‑30天。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤P3具体为：向P2的离心管中加入20mL含有体积分数0.1％茶皂素的PEM缓冲液，浸泡30‑40分钟，然后用PEM缓冲液润洗3次，每次 20分钟，将润洗后的材料在含体积分数4％多聚甲醛的PBS缓冲液中，于‑20℃真空干燥条件下固定30‑40分钟，然后再次用PEM缓冲液冲洗3次，每次5分钟。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，重复步骤P4，以获得多个解剖后的材料，且解剖后的材料数量不超过6个。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤P5的消化处理过程中，随时镜检，直至观察到维管束上残留的组织消化完全。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤P6中所述Triton X‑100的浓度为5％。
一种从双子叶植物根及下胚轴中分离维管束的方法专利购买费用说明
Q：办理专利转让的流程及所需资料
A：专利权人变更需要办理著录项目变更手续，有代理机构的，变更手续应当由代理机构办理。
1：专利变更应当使用专利局统一制作的“著录项目变更申报书”提出。
2：按规定缴纳著录项目变更手续费。
3：同时提交相关证明文件原件。
4：专利权转移的，变更后的专利权人委托新专利代理机构的，应当提交变更后的全体专利申请人签字或者盖章的委托书。
Q:专利著录项目变更费用如何缴交
A：（1）直接到国家知识产权局受理大厅收费窗口缴纳,（2）通过代办处缴纳，（3）通过邮局或者银行汇款,更多缴纳方式
Q：专利转让变更，多久能出结果
A：著录项目变更请求书递交后，一般1-2个月左右就会收到通知，国家知识产权局会下达《转让手续合格通知书》。
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